Journal of separation science
2019
Wang C, Du X, Xie T, Li H
系统进化指数富集(SELEX)是筛选适配体的传统方法,在生物传感领域具有潜力,但筛选前对 DNA 文库或靶标进行化学修饰可能遮蔽适配体与靶标之间的真实识别和结合位点。本研究提出一种无标记、无修饰的原位筛选策略,以克服该限制。该策略基于电泳迁移率变动实验原理,将牛血清白蛋白(BSA)预先混入琼脂糖凝胶中,使未修饰的单链 DNA 文库在...
Analytical and bioanalytical chemistry
2017
Lee KH, Zeng H
针对未修饰且未固定靶标的适配体筛选一直是研究难点。本文提出一种新型双文库(DL)SELEX策略,并证明其在发现单链DNA和RNA适配体方面的通用性与有效性。该策略无需对靶标进行化学修饰或固定,即可从小分子(如多西环素)到大分子蛋白(如VEGF165)筛选出具有纳摩尔级结合亲和力的适配体。同一筛选循环还可同时获得识别同一蛋白不同表位的...
Journal of analytical methods in chemistry
2015
Martin JA, Mirau PA, Chushak Y, Chávez JL 等 7 人
本研究提出一种基于定制 DNA 微阵列的单轮适配体先导识别方法。作者利用计算驱动的图案化 DNA 文库,在不使用已知凝血酶适配体序列信息的情况下,在 8×15k 微阵列上固定 5000 条具有增强二级结构复杂度的寡核苷酸序列,以筛选凝血酶结合适配体。实验以 Cy3 标记凝血酶与微阵列杂交,通过荧光扫描识别结合候选序列,并以 stre...