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One-pot two-strain system based on glucaric acid biosensor for rapid screening of myo-inositol oxygenase mutations and glucaric acid production in recombinant cells.

Metabolic engineering 2018

近年来,重组细胞中 D-葡萄糖酸(GA)生产取得进展,亟需高通量筛选和选择性能更优的重组细胞或生物催化剂。2016 年已开发一种在大肠杆菌中将 GA 浓度转化为荧光信号的生物传感器系统,但其应用报道较少。本文建立了一种不依赖微流控平台等专用装置的有效高通量筛选方法,并进行初步应用。在该一锅双菌株体系中,含有 GA 合成途径的产酸菌或...

Heme bioavailability and signaling in response to stress in yeast cells.

The Journal of biological chemistry 2018 Hanna DA, Hu R, Kim H, Martinez-Guzman O 等 6 人

血红素是必需辅因子和信号分子,也可能具有细胞毒性。为限制游离血红素,细胞通常将血红素合成与利用紧密偶联,但稳态可交换血红素(labile heme, LH)池是否支持血红素依赖过程仍不清楚。作者以酿酒酵母为模型,结合荧光血红素传感器、位点特异性血红素螯合剂和分子遗传学方法,发现:(1)在血红素耗竭条件下,酵母优先利用LH;(2)螯合...

Screening Phosphorylation Site Mutations in Yeast Acetyl-CoA Carboxylase Using Malonyl-CoA Sensor to Improve Malonyl-CoA-Derived Product.

Frontiers in microbiology 2018 Chen X, Yang X, Shen Y, Hou J 等 5 人

丙二酰辅酶A(malonyl-CoA)是多种生物化学物与生物燃料合成的关键前体,在酿酒酵母中由乙酰辅酶A羧化酶Acc1p催化生成,并受Snf1蛋白激酶磷酸化负调控,导致胞内水平较低,限制下游产物合成。本研究设计了一种合成malonyl-CoA荧光生物传感器,以细菌转录因子FapR、fapO操纵子和yeGFP报告基因为核心,通过TEF...