Environmentally Sensitive Color-Shifting Fluorophores for Bioimaging.
本文报道了一类环境敏感变色荧光团（CSFs），其通过分子内螺环化在绿色荧光螺环形式与红色荧光两性离子形式之间可逆切换。该螺环化平衡对微环境敏感，可通过测定红/绿荧光比直接读出，从而构建比率型荧光探针与生物传感器。作者将 CSF 与 HaloTag7 自标记蛋白标签及钙结合域融合，构建了半合成比率钙离子传感器 rHCaMP，用于活细胞...
Dynamic tuning of FRET in a green fluorescent protein biosensor.
Förster 共振能量转移（FRET）在绿色荧光蛋白突变体之间被广泛用于监测蛋白质相互作用，并作为荧光生物传感器的读出模式。尽管荧光团之间的距离和分子夹角对 FRET 至关重要，但荧光蛋白 FRET 的结构细节一直缺乏。本文报道了荧光蛋白 mCerulean3 和 cpVenus 在生物传感器 Twitch-2B 内发生 FRET...
Homo-FRET Based Biosensors and Their Application to Multiplexed Imaging of Signalling Events in Live Cells.
基于 Förster 共振能量转移（FRET）生物传感器的多路复用成像，为在单个活细胞内监测信号通路时空关联提供了有力手段。本文讨论基于同色 FRET（homo-FRET）的生物传感器在多路复用成像中的潜力。作者证明，用 mCherry 标记的 Akt 蛋白 PH 结构域（Akt-PH）之间的 homo-FRET，可用于监测活细胞中...
Large Scale Bacterial Colony Screening of Diversified FRET Biosensors.
基于荧光蛋白突变体之间 Förster 共振能量转移（FRET）的生物传感器已广泛用于生理学与生物化学研究，但许多 FRET 传感器在亚最优实验条件下 FRET 变化较小，测量困难。当前领域的重要任务之一是开发新的优化策略。本文报道了通过细菌菌落大规模筛选突变体 FRET 传感器文库来优化 FRET 变化的方法。作者优化了传感器表达...
Excited-state structural dynamics of a dual-emission calmodulin-green fluorescent protein sensor for calcium ion imaging.
荧光蛋白在生物成像和生物医学研究中发挥关键作用，其成像能力取决于蛋白口袋内嵌入色原子的激发态结构动力学。本研究利用飞秒受激拉曼光谱（FSRS）考察新型钙离子（Ca2+）荧光蛋白传感器 GEM-GECO1 的激发态构象动力学。结果表明，在无 Ca2+ 时，主导骨架运动为约 170 cm−1 的苯酚环面内摇摆，该运动促进激发态质子转移（...