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Designing and Assembling Plasmids for the Construction of Escherichia coli Biosensor for Vibrio cholerae Detection.

Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) 2018 Holowko MB, Poh CL

在构建和表征用于霍乱弧菌检测的全细胞生物传感器过程中,作者采用两种核心技术:利用Gibson等温组装反应组装PCR扩增的质粒片段(DNA parts),并利用微孔板荧光读数对工程化大肠杆菌菌株进行表征。总体流程为:先在计算机中设计DNA片段,再通过等温组装构建质粒,随后转化至大肠杆菌,最后使用微孔板读数仪评估菌株表现。由于传感器设计...

Repurposing a Two-Component System-Based Biosensor for the Killing of Vibrio cholerae.

ACS synthetic biology 2017 Jayaraman P, Holowko MB, Yeoh JW, Lim S 等 5 人

本研究开发了一种体外概念验证的“感知-杀灭”系统,利用合成生物学方法在野生型大肠杆菌中靶向霍乱弧菌。工程化大肠杆菌通过霍乱弧菌群体感应分子 CAI-1 特异性识别病原菌,并响应表达裂解蛋白 YebF-Art-085,使宿主自裂解释放杀菌蛋白 Art-085,从而杀灭霍乱弧菌。作者分别表征了 YebF-Art-085 与 Art-08...

全细胞生物传感器 霍乱弧菌群体感应CRISPRi自裂解

A luminescent hybridoma-based biosensor for rapid detection of V. cholerae upon induction of calcium signaling pathway.

Biosensors & bioelectronics 2016 Zamani P, Sajedi RH, Hosseinkhani S, Zeinoddini M 等 5 人

本研究开发了一种基于杂交瘤细胞的生物传感器,用于快速、灵敏、选择性检测霍乱弧菌O1(Vibrio cholerae O1),并将抗体–抗原结合事件转换为生物发光信号。在评估杂交瘤细胞性能后,作者将特异性杂交瘤细胞转染海肾素(aequorin)报告基因,构建稳定发光的生物传感器,并测定其生物发光活性。该传感器灵敏度可达50 CFU/m...

Identification of in vivo regulators of the Vibrio cholerae xds gene using a high-throughput genetic selection.

Molecular microbiology 2014 McDonough E, Lazinski DW, Camilli A

霍乱弧菌是霍乱的致病菌,在水体与人体肠道之间转移,并在生命周期不同阶段发生适应性基因表达变化。xds 基因编码一种分泌型外切核酸酶,此前被发现可在感染过程中诱导表达。本研究旨在鉴定负责 xds 在体内特异性诱导的调控因子。作者将 xds 与两个串联抗生素抗性基因融合,用于筛选在非诱导条件下使 xds 融合表达增强的转座子突变体,并通...