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Open Source High Content Analysis Utilizing Automated Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy.

Journal of visualized experiments : JoVE 2017 Görlitz F, Kelly DJ, Warren SC, Alibhai D 等 20 人

本文介绍一种开源高内容分析(HCA)仪器,利用自动荧光寿命成像(FLIM)对多孔板中固定或活细胞进行Förster共振能量转移(FRET)读出,以检测蛋白相互作用、寡聚化、异二聚化及细胞信号过程。该系统基于宽场时间门控成像,采用门控光学图像增强器(GOI)、延迟发生器和冷却CCD相机,结合Nipkow旋转盘实现光学切片,可在每个视野...

Systems level-based RNAi screening by high content analysis identifies UBR5 as a regulator of estrogen receptor-α protein levels and activity.

Oncogene 2015 Bolt MJ, Stossi F, Callison AM, Mancini MG 等 6 人

雌激素受体α(ERα)是调控乳腺生理和乳腺癌发生的关键转录因子。本研究利用自建 siRNA 文库,对核心调节因子、转录修饰因子、信号分子和 DNA 损伤应答蛋白进行筛选,以鉴定 ERα 介导转录调控的新型调节因子。筛选基于显微镜成像、多终点雌激素响应生物传感器细胞系平台,可同时检测 ERα 蛋白水平、核转位、染色质重塑和报告基因 m...