基因编码生物传感器可将期望表型与可检测输出相耦合，已广泛用于检测多种天然和非天然产物。与不同高通量筛选（HTS）方法结合后，这些传感器可在不同通量水平下实现以产物为导向的高效筛选，从而加速微生物细胞工厂的工程化与优化，使其生产多种目标化合物。为实现微生物细胞工厂的有效HTS，生物传感器需具备若干关键特性。其性能特征显著影响在HTS中...
Gq/11偶联G蛋白偶联受体（GPCR）通过动员钙离子调控关键生理过程，使胞内Ca2+动态成为药物发现和生物标志物检测的重要读出。然而钙信号短暂，需要专用仪器实时监测，限制高通量筛选和普及。本文报道发光钙生物传感器CalLuc-2.1，可将短暂Ca2+峰转化为刺激后数十分钟仍可读取的持续发光变化，无需精确计时检测，即可用标准酶标仪进...
乙酰胆碱酯酶（AChE）是中枢神经系统中负责快速水解神经递质乙酰胆碱（ACh）的关键酶，其异常活性与有机磷农药中毒、阿尔茨海默病和重症肌无力等密切相关。现有 AChE 抑制剂检测方法存在生物相容性低、通量低、操作复杂和成本高等局限。本研究利用遗传编码的 ACh 荧光传感器 GACh3.0，构建稳定共表达 ACh 探针与人源 AChE...
基因编码死亡指示器（GEDI）是一种比率型双荧光生物传感器，可通过钙离子内流实时检测细胞死亡。GEDI 最初用于神经退行性疾病模型，现可应用于癌细胞，以单细胞分辨率量化治疗诱导的死亡。本方案详述如何构建稳定表达 GEDI 的癌细胞系，利用辐射或化疗药物经验性确定应激诱导的 GEDI 阈值，并通过时间分辨成像与图像分析追踪细胞命运。该...
微滴包埋细胞是高通量生物学检测的有力工具，广泛应用于突变体筛选和菌株工程，通常需要严格区室化以防止细胞或分子在微滴间转移。尽管此前已报道荧光分子可在微滴间转移，但常见小分子底物和产物是否转移及其对生物学结果的影响尚不清楚。本研究利用基于全细胞的生物传感器体系，证明乙醇等小醇类和弱酸等生物相关分子可在多分散水包油微滴间转移。此类转移会...