Switch-like PKA responses in the nucleus of striatal neurons.
虽然已知细胞核中的蛋白激酶A（PKA）调控基因表达，但核内PKA信号的特异性仍不清楚。本研究结合计算建模与小鼠脑片中PKA依赖性磷酸化的活细胞成像，探讨短暂多巴胺信号如何转化为皮层锥体神经元和纹状体中棘神经元中的核内PKA活性。作者观察到，纹状体神经元的核内PKA信号具有超敏感响应，伴随快速的全或无反应，这与通常认为的催化亚基在核内...
pH sensitivity of FRET reporters based on cyan and yellow fluorescent proteins.
通常认为，遗传编码报告蛋白中常用的青色和黄色荧光蛋白在接近生理pH范围内具有强pH敏感性。我们研究了这些pH响应对在活BHK细胞胞质中表达的模型FRET串联体和基于FRET的cAMP依赖性蛋白激酶活性报告蛋白（AKAR）胞内信号的影响，并通过尼日里菌素离子载体改变胞内pH。尽管供体和受体的同时pH敏感性在某些情况下可能相互掩盖，但与...
Biosensor imaging in brain slice preparations.
蛋白激酶A（PKA）广泛存在于动物界，在神经系统中作为激酶效应器整合多种神经调质的细胞效应。近年来发展的荧光共振能量转移（FRET）生物传感器，如AKAR，使活细胞中PKA激活的直接测量成为可能：只需在CFP激发下测量CFP与YFP发射波长的荧光比值。该方法可在细胞甚至亚细胞水平提供秒级时间分辨率的数据，为理解时空信号整合开辟新途径...