精确识别低频 EGFR L858R 突变对非小细胞肺癌（NSCLC）靶向治疗和预后至关重要。本文提出 CIRCLE-F/V，一种双模式 CRISPR-Cas13a 级联生物传感器，通过整合荧光与视觉读出实现超灵敏、特异的突变检测。该系统将限制性内切酶辅助突变富集与循环 CRISPR 信号放大相结合：基因组 DNA 先用 MscI 选...
植物病毒是全球农业的重大威胁，造成严重减产并危及粮食安全。准确识别这些病毒对防止作物大面积受损和有效管理至关重要。CRISPR-Cas13a 是靶向 RNA 的 Cas13 亚型，已成为分子诊断中的变革性工具，尤其适用于高精准检测植物 RNA 病毒。与 ELISA、RT-PCR 等传统方法相比，Cas13a 具有卓越特异性和阿托摩尔...
遗传序列检测是物种鉴别、肿瘤基因分型和病原体鉴定的金标准，开发可及且经济的分子检测方法具有重要意义。基于等离子体纳米粒子（如金纳米粒子，AuNPs）的生物传感器可提供高灵敏、低成本、易操作且无标记的传感平台，但传统终点读数缺乏时间与动力学信息，限制定量检测。本研究提出CRISPR关联等离子体比色法（Ca-PCM），将LwaCas13...
由严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）引起的新型冠状病毒肺炎（COVID-19）快速持续传播，凸显了对简便、灵敏病毒检测方法的需求。本文报道了一种基于CRISPR-Cas13a技术、免疫捕获磁珠增强的电化学生物传感器，用于超灵敏检测SARS-CoV-2。检测核心采用低成本、免固定化的商用碳印刷电极测量电化学信号；链霉...
自2019年底以来，严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）引发新冠疫情，Omicron成为最新关切变异株，其中BA.5正取代BA.2成为全球主要亚型。BA.5携带L452R突变，增强了在已接种疫苗人群中的传播能力。目前识别SARS-CoV-2变异株主要依赖PCR后测序，流程耗时且设备昂贵。本研究开发了一种快速、超灵敏的...
成簇规律间隔短回文重复（CRISPR）系统是原核生物抵御噬菌体和质粒入侵的天然适应性免疫系统。CRISPR-Cas系统分为两大类六型，其中VI型中的CRISPR/Cas13a系统因具有Cas13a蛋白的反式切割活性和crRNA的高特异性，在分子诊断、基因治疗、基因编辑和RNA成像中应用最广。本文综述了CRISPR/Cas13a系统检...
严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）感染引起2019冠状病毒病（COVID-19）并全球传播，可靠诊断是公共卫生优先事项。本文报道一种快速（<1 h）、易实施且准确的CRISPR基倏逝波荧光生物传感平台，用于检测SARS-CoV-2。该平台将Cas13a的旁路切割效应与通用无酶杂交链反应（HCR）相耦合：设计含切割位...
微小RNA（miRNA）是疾病诊断的重要生物标志物，快速、灵敏、特异检测 miRNA 对早期疾病诊断具有重要意义。本文结合 CRISPR-Cas13a 系统与催化发夹组装（CHA）构建了一种用于检测 miRNA-21 的超灵敏电化学生物传感平台。发夹 DNA 1（H1）通过 Au-S 键自组装于金电极表面，并用 6-巯基-1-己醇（...
针对食品中病原菌污染引发的食源性疾病，本研究利用CRISPR-Cas13a系统的crRNA可编程性和Cas13a在识别靶RNA后产生的无差别RNase旁路活性，开发了名为CCB-Detection的细菌检测策略。以金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus, S. aureus）为模型菌，方法包括四步：简单提取基因组...