A high-throughput screen of real-time ATP levels in individual cells reveals mechanisms of energy failure.

PLoS biology 2018 Mendelsohn BA, Bennett NK, Darch MA, Yu K 等 13 人

能量代谢不足或失调可能参与多种遗传性、退行性疾病、癌症甚至衰老。ATP 是细胞中央能量载体，但调控 ATP 水平的关键通路尚未系统阐明。作者将富集线粒体基因的池化 CRISPRi 文库、荧光生物传感器和流式细胞分选（FACS）结合，建立高通量遗传筛选，用于检测活人细胞中 ATP 浓度。该策略鉴定出此前未知参与能量代谢的基因。多数线粒...

荧光生物传感器 ATP生物传感器FRETCRISPRi流式细胞分选

Designing and Assembling Plasmids for the Construction of Escherichia coli Biosensor for Vibrio cholerae Detection.

Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) 2018 Holowko MB, Poh CL

在构建和表征用于霍乱弧菌检测的全细胞生物传感器过程中，作者采用两种核心技术：利用Gibson等温组装反应组装PCR扩增的质粒片段（DNA parts），并利用微孔板荧光读数对工程化大肠杆菌菌株进行表征。总体流程为：先在计算机中设计DNA片段，再通过等温组装构建质粒，随后转化至大肠杆菌，最后使用微孔板读数仪评估菌株表现。由于传感器设计...

全细胞生物传感器 霍乱弧菌合成生物学CRISPRi群体感应