激酶转位报告基因（KTRs）是单细胞测量时间积分激酶活性的有力工具，但动态范围受限、灵敏度有限，尤其在神经元中。为克服这些局限，我们通过（i）增大 KTR 尺寸，减少 KTR 通过核孔扩散的干扰；（ii）调节其激酶传感器结构域中双组分核定位信号（bNLS）强度，确保 KTR 在核与胞质间的相对分布由主动核输入、主动核输出及其对应激酶...
细胞外调节激酶（ERK）通过不同激活模式调控多种细胞功能。基因编码荧光探针是解析活细胞 ERK 活性动态的重要工具。本研究在已报道的 ERK 荧光共振能量转移（FRET）探针 EKAREN5 基础上，将 mTurquoise2 和 YPet 序列分别替换为 mTurquoise-GL 和 YPet 同义密码子变体，构建改良生物传感器...
蛋白激酶表达与活性增强是肿瘤细胞增殖和癌症进展的关键，相关激酶形成复杂互作网络。为评估激酶抑制剂对信号网络的影响，作者建立了基于荧光共振能量转移（FRET）生物传感器的高内涵成像方法，用于在两种三阴性乳腺癌（TNBC）细胞系 HCC1806 和 Hs578T 中定量检测 ERK 和 AKT 活性。首先利用 EGF 刺激及不同 MEK...
磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸依赖性 Rac 交换因子 1（P-Rex1）是生长因子诱导 Rac1 激活的关键介质，Rac1 是一种广泛参与肌动蛋白细胞骨架重组的小 GTP 结合蛋白。该鸟嘌呤核苷酸交换因子（GEF）在人类腔隙型乳腺癌中过表达，其表达与疾病进展、转移扩散和预后不良相关。尽管 P-Rex1 对 Rac 激活和细胞运动的...
近年来，荧光成像因荧光蛋白和荧光染料日益丰富而受到特别关注，并推动了新型生物传感器的发展。基于 Förster 共振能量转移（FRET）原理的基因编码生物传感器已广泛用于生物学中，以可视化信号分子的时空动态。尽管此类生物传感器数量不断增加，但由于 FRET 生物传感器稳定表达困难，其应用大多局限于瞬时表达生物传感器的培养细胞。本研究...