Single-Cell-Based Screening and Engineering of d-Amino Acid Amidohydrolases Using Artificial Amidophenol Substrates and Microbial Biosensors.

Journal of agricultural and food chemistry 2022 Yeom SJ, Kwon KK, An JU, Park SH 等 10 人

对映体纯 D-氨基酸是肽模拟物和半合成抗生素中重要的手性构建块。本研究采用基于转录因子的筛选策略，利用酶特异性氨基酚人工底物快速筛选 D-立体特异性氨基酸酰胺酶。作者以 D-苏氨酸苯基酰胺衍生物 DTHPA 为底物，在 D-苏氨酸酰胺酶存在下水解生成 2-氨基苯酚，后者作为潜在酶指示物激活遗传电路。对已知细菌的比较分析显示，若干芽孢...

全细胞生物传感器 D-氨基酸酰胺酶氨基酚人工底物遗传电路生物传感器单细胞筛选

Engineering ligand-specific biosensors for aromatic amino acids and neurochemicals.

Cell systems 2022 Rottinghaus AG, Xi C, Amrofell MB, Yi H 等 5 人

微生物生物传感器可用于代谢工程与医学中的动态调控和诊断。然而，天然传感器常同时识别结构相似但功能不同的配体，特异性不足。本研究以一般公认安全菌株大肠杆菌 Nissle 1917（EcN）为宿主，表征了可泛化识别芳香氨基酸或神经化学物的 TyrR 和 TynA-FeaR 两套传感器系统。通过理性蛋白工程，作者基于结构信息选择并定点突变...

全细胞生物传感器 芳香氨基酸神经化学物转录因子工程GFP荧光