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Ultrasensitive Real-Time Rolling Circle Amplification Detection Enhanced by Nicking-Induced Tandem-Acting Polymerases.

Analytical chemistry 2019 Tian B, Fock J, Minero GAS, Garbarino F 等 5 人

基于锁探针连接(PLP)的滚环扩增(RCA)可区分单核苷酸变异,有望用于结核分枝杆菌(Mtb)等病原体耐药突变检测,但常规线性 RCA 的皮摩尔级检出限限制了临床应用。本文提出并验证了切割增强型 RCA(NickRCA)机制:限制性内切酶在环化模板上产生切口,使多个聚合酶在同一环模板上串联作用,释放单链扩增子单体。作者系统考察并控制...