A screening-compatible live cell fluorescence resonance energy transfer-based assay for modulation of Rho GTPase activity.

STAR protocols 2022 Müller PM, Rocks O

Rho家族GTP酶是细胞骨架动态的核心调控因子，其活性受鸟苷酸交换因子（RhoGEF）和GTP酶激活蛋白（RhoGAP）调控。本方案提供一套稳健、可高通量筛选的活细胞荧光共振能量转移（FRET）生物传感器检测流程，用于在天然细胞环境中分析RHOA、RAC1和CDC42等GTP酶活性变化。该传感器为遗传编码单链报告蛋白，包含循环置换m...

荧光生物传感器 Rho GTPaseFRET生物传感器活细胞成像RhoGEF

Multiplexed GTPase and GEF biosensor imaging enables network connectivity analysis.

Nature chemical biology 2020 Marston DJ, Vilela M, Huh J, Ren J 等 9 人

本文通过在多种鸟嘌呤核苷酸交换因子（GEF）共有的结构铰链区插入荧光蛋白对，构建了用于检测 Dbl 家族 RhoGEF 活性的荧光共振能量转移（FRET）生物传感器。荧光生物传感器可映射信号分子在活细胞中的时空激活，但此前难以量化不同激活事件如何相互影响或贡献特定细胞行为。作者将 GEF 生物传感器与红移 Rho GTPase 生物...

荧光生物传感器 FRET生物传感器RhoGEFRho GTPase活细胞成像