Biotechnology letters
2019
Bai D, Ding D, Li J, Cong L 等 5 人
本研究旨在通过理性突变分析、生物传感器与计算机辅助模拟相结合，确定大肠杆菌 TyrR 蛋白中 L-苯丙氨酸（L-Phe）的结合位点。TyrR 是芳香族氨基酸合成与转运相关基因的主要转录调控因子，其配体结合位点的鉴定是蛋白功能注释和基于结构的蛋白设计的重要基础。作者构建了以 tyrP 启动子驱动绿色荧光蛋白（GFP）表达、并携带 Ty...
Analytica chimica acta
2018
Lin C, Jair YC, Chou YC, Chen PS 等 5 人
临床诊断苯丙酮尿症（PKU）需同时定量苯丙氨酸（Phe）和酪氨酸（Tyr），但现有酶法、串联质谱和高效液相色谱方法前处理繁琐、设备昂贵且难以同时检测。本研究基于大肠杆菌 TyrR 转录调控系统开发全细胞荧光生物传感器，利用 Phe 激活 tyrP 启动子驱动 GFP 表达，Tyr 抑制 aroF 启动子驱动 RFP 表达，实现双信号...
ACS synthetic biology
2017
Liu Y, Zhuang Y, Ding D, Xu Y 等 6 人
成功进化代谢物生产微生物需要在短时间内获得所需性状的高通量筛选方法。本研究开发了一种转录因子驱动装置，将代谢物响应元件与选择模块相结合。该装置能够特异性感知胞内 L-苯丙氨酸（L-Phe），并将该信号转化为可观察表型。应用该装置，通过从核糖核苷酸结合位点（RBS）库和随机突变库中筛选高产表型，成功提高了 L-Phe 产量。此外，鉴定...