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Real-Time cAMP Dynamics in Live Cells Using the Fluorescent cAMP Difference Detector In Situ.

Journal of visualized experiments : JoVE 2024 Cattani-Cavalieri I, Margolis J, Anicolaesei C, Nuñez FJ 等 5 人

cAMP 差异检测器原位(cADDis)是一种新型生物传感器,可连续测量活细胞中环磷酸腺苷(cAMP)水平。该传感器由环状置换荧光蛋白连接至 Epac2 铰链区构建,形成单一荧光团生物传感器,结合 cAMP 后荧光可升高或降低。传感器具有红色和绿色向上版本以及绿色向下版本,并可提供靶向不同亚细胞定位的版本。本研究采用绿色向下 cAD...

Human Pseudoislet System for Synchronous Assessment of Fluorescent Biosensor Dynamics and Hormone Secretory Profiles.

Journal of visualized experiments : JoVE 2023 Richardson TM, Pettway YD, Walker JT, Nelson HA 等 11 人

朗格汉斯胰岛是分散于胰腺中的小型三维内分泌与支持细胞集合,通过β细胞分泌胰岛素降低血糖、α细胞分泌胰高血糖素升高血糖,在血糖稳态调控中起核心作用。包括cAMP介导通路在内的细胞内信号通路对α和β细胞激素分泌的调控至关重要。然而,胰岛的三维结构给原代人胰岛细胞内信号机制研究带来实验挑战。为克服这些限制,本文描述一种整合活细胞成像与微流...