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Single-Cell Activation of the cAMP-Signaling Pathway in 3D Tissues with FRET-Assisted Two-Photon Activation of bPAC.

ACS chemical biology 2020 Kinjo T, Watabe T, Kobachi K, Terai K 等 5 人

细菌光激活腺苷酸环化酶(bPAC)广泛用于信号转导研究,但其双光子吸收截面低,难以通过双光子激发高效激活。本研究利用单体青色荧光蛋白1(mTFP1)的高双光子吸收特性,基于FRET辅助光激活技术开发了可双光子激活的bPAC(2pabPAC),即mTFP1ΔC11与bPAC的融合蛋白。在2pabPAC中,mTFP1吸收870 nm双光...

FRET and BRET-based biosensors in live cell compound screens.

Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) 2014 Robinson KH, Yang JR, Zhang J

利用遗传编码荧光或生物发光生物传感器在活细胞中进行化合物筛选,是鉴定特定信号事件新型调控分子的有效策略。活细胞筛选可保持完整信号网络,因此不仅针对单一目标分子,还可发现信号网络中任何能够调节该事件的分子;同时只有细胞可渗透或作用于细胞表面受体的化合物会被识别为命中,从而减少后续细胞渗透性优化。本文提供在96孔板中使用遗传编码生物传感...

Striatal neurones have a specific ability to respond to phasic dopamine release.

The Journal of physiology 2013 Castro LR, Brito M, Guiot E, Polito M 等 9 人

cAMP/蛋白激酶A(PKA)信号级联广泛存在,且级联各步骤酶类常以多种亚型表达。本研究比较前额叶皮层锥体神经元与表达独特信号蛋白组合的纹状体神经元,分析多巴胺D1受体激活所触发cAMP/PKA信号的动态整合。利用小鼠脑片中的荧光生物传感器成像发现,纹状体中型多棘神经元对D1受体激活的cAMP/PKA反应比皮层锥体神经元更强、更快且...