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FluoSTEPs: Fluorescent biosensors for monitoring compartmentalized signaling within endogenous microdomains.

Science advances 2021 Tenner B, Zhang JZ, Kwon Y, Pessino V 等 8 人

越来越多的证据表明,许多关键胞内信号事件被区室化于动力学不同的细胞微区室中。遗传编码荧光生物传感器是解析区室化信号的强大工具,但现有方法通常依赖目标蛋白融合与过表达,可能干扰天然信号通路。本文提出一类名为 FluoSTEPs(靶向内源蛋白的荧光传感器)的新型生物传感器,将自互补分裂绿色荧光蛋白、CRISPR 介导的基因敲入和荧光共振...

荧光生物传感器 FRETcAMP内源微区室CRISPR-Cas9

A yeast FRET biosensor enlightens cAMP signaling.

Molecular biology of the cell 2021 Botman D, O'Toole TG, Goedhart J, Bruggeman FJ 等 6 人

出芽酵母中的 cAMP-PKA 信号级联调控细胞对变化环境的适应。作者开发了 yEPAC,一种基于 FRET 的酵母 cAMP 生物传感器,并结合同步流式细胞术,在突然营养转换过程中对单细胞水平的动态 cAMP 变化进行高通量定量。研究发现,特征性 cAMP 峰能够区分不同碳源转换,并在单细胞间较为均一,尤其向葡萄糖转换时最为明显。...