Science advances
2021
Tenner B, Zhang JZ, Kwon Y, Pessino V 等 8 人
越来越多的证据表明,许多关键胞内信号事件被区室化于动力学不同的细胞微区室中。遗传编码荧光生物传感器是解析区室化信号的强大工具,但现有方法通常依赖目标蛋白融合与过表达,可能干扰天然信号通路。本文提出一类名为 FluoSTEPs(靶向内源蛋白的荧光传感器)的新型生物传感器,将自互补分裂绿色荧光蛋白、CRISPR 介导的基因敲入和荧光共振...
Molecular biology of the cell
2021
Botman D, O'Toole TG, Goedhart J, Bruggeman FJ 等 6 人
出芽酵母中的 cAMP-PKA 信号级联调控细胞对变化环境的适应。作者开发了 yEPAC,一种基于 FRET 的酵母 cAMP 生物传感器,并结合同步流式细胞术,在突然营养转换过程中对单细胞水平的动态 cAMP 变化进行高通量定量。研究发现,特征性 cAMP 峰能够区分不同碳源转换,并在单细胞间较为均一,尤其向葡萄糖转换时最为明显。...
International journal of molecular sciences
2021
Danish A, Gedschold R, Hinz S, Schiedel AC 等 8 人
连接蛋白间隙连接(Cx GJs)允许小分子和离子在细胞间传递,对细胞通讯至关重要;其功能障碍与多种疾病相关,因此能调节间隙连接的小分子可能成为治疗药物。为筛选间隙连接调节剂,本研究建立了一种新型细胞检测法。作者以重组表达 Cx43 的 HeLa 细胞为基础,构建供体细胞和生物传感器细胞:供体细胞额外表达 Gs 蛋白偶联腺苷 A2A ...
Journal of molecular and cellular cardiology
2021
Abi-Gerges A, Castro L, Leroy J, Domergue V 等 6 人
心肌细胞中,PDE3和PDE4是降解β肾上腺素能受体(β-AR)产生cAMP的主要酶,并调节L型钙电流(ICa,L)。心脏肥大(CH)伴随PDE3/PDE4下降,但其对胞质cAMP与ICa,L动态调节的影响未知。作者用胸主动脉缩窄诱导大鼠CH,5周后分离SHAM与CH左心室心肌细胞(LVMs),以腺病毒转导FRET型cAMP生物传感...