Communications biology
2024
Lai C, Yang L, Pathiranage V, Wang R 等 7 人
遗传编码荧光生物传感器已成为实时观察活细胞生理过程的重要工具,但用于哺乳动物细胞硫酸根离子成像的传感器仍缺乏。本研究报道了一种名为Thyone的绿色荧光硫酸根传感器。Thyone通过结构引导设计由亮绿色荧光蛋白mNeonGreen改造而来,在哺乳动物细胞中与硫酸根离子发生亚秒级结合,并产生显著的负荧光响应,表观亲和力为11 mM。作...
Frontiers in bioengineering and biotechnology
2024
Subach OM, Piatkevich KD, Subach FV
汞离子检测在环境监测和细胞生物学研究中具有重要意义,但现有基因编码汞离子传感器存在荧光响应为负、动态范围窄或需要补充辅因子等局限。本研究以环状置换的mNeonGreen绿色荧光蛋白(cpmNeonGreen)和来自志贺氏菌Shigella flexneri的汞结合蛋白MerP为基础,通过理性构建与随机突变筛选,开发了NeMeHg和i...
ACS synthetic biology
2022
Copeland CE, Kim J, Copeland PL, Heitmeier CJ 等 5 人
基于无细胞蛋白合成(CFPS)的生物传感器具有高精度、低成本优势,但生物标志物在多种生物样本中常处于低浓度,因此需扩大动态范围并降低检出限,同时避免高背景。以往提高动态范围多依赖放大分析物输入信号,可能引入假阳性。本研究旨在提高 CFPS 系统的蛋白合成能力和报告蛋白输出信号,以实现更低 LOD。作者引入新型荧光蛋白 mNeonGr...
ACS sensors
2020
Zarowny L, Aggarwal A, Rutten VMS, Kolb I 等 14 人
基于绿色荧光蛋白(GFP)的基因编码钙离子指示剂(GECI)是成像细胞信号与神经活动的有力工具。经过近二十年持续优化,基于水母绿色荧光蛋白(avGFP)的GCaMP系列最新一代(GCaMP7)可能已接近GFP固有性能极限。为继续提升GECI性能,作者以高亮单体绿色荧光蛋白mNeonGreen(mNG)为骨架,通过理性设计、连接肽优化...