International journal of molecular sciences
2020
溶菌酶是研究蛋白质结构与功能关系的经典模型蛋白，近期也被用于加速以细菌为主的二级污泥降解，但针对溶菌酶工程化的高通量筛选系统尚未见报道。本文建立了一种基于遗传编码生物传感器的T4溶菌酶（T4L）筛选系统。作者将T4L基因克隆至araBAD启动子（PBAD）控制的质粒中，并在大肠杆菌DH5α中实现可溶性表达，且未对细胞生长产生毒性。进...
Metallomics : integrated biometal science
2020
Costello A, Parker J, Clynes M, Murphy R
细菌群落长期暴露于医疗、水产和农业中的铜等金属，而金属抗性基因常与抗生素抗性基因共选择，因此铜的形态及其细胞摄取可能影响抗性演化。本文基于大肠杆菌cue铜稳态系统开发了全细胞细菌生物传感器：组成型启动子驱动CueR表达，CueR在胞内Cu(I)存在时由pCopA启动子的阻遏因子转为激活因子，驱动sfGFP报告基因转录，从而以荧光强度...
Metabolic engineering
2020
微生物对苯二甲酸（TPA）降解途径在少数能降解该外源芳香化合物的细菌中保守，但成功在异源宿主中表达以实现 TPA 高效利用的报道很少。本研究通过异源表达 Comamonas sp. E6 的 tph 降解操纵子和转运基因，在 Acinetobacter baylyi ADP1 中工程化 TPA 转化。利用染色体插入、靶向基因扩增和适...