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Metabolically-targeted dCas9 expression in bacteria.

Nucleic acids research 2023 Pellegrino GM, Browne TS, Sharath K, Bari KA 等 8 人

在复杂微生物组中将基因表达限制于相关细菌物种是一个未解决问题。在人类微生物组背景下,一种理想的靶标代谢活性是葡萄糖醛酸利用酶(GUS),其参与人体胃肠道中葡萄糖醛酸化化合物的毒性再激活,包括化疗药物伊立替康。我们利用细菌中 GUS 酶分布的差异来区分具有 GUS 活性的细菌,并将葡萄糖醛酸响应型 GusR 转录因子重新用作生物传感器...

全细胞生物传感器 dCas9CRISPRiGusRβ-葡萄糖醛酸酶

Demonstration of an optical biosensor for the detection of faecal indicator bacteria in freshwater and coastal bathing areas.

Analytical and bioanalytical chemistry 2019 Briciu-Burghina C, Heery B, Duffy G, Brabazon D 等 5 人

ColiSense是一种用于快速检测大肠杆菌(E. coli)的光学生物传感器系统,以β-葡萄糖醛酸酶(GUS)作为大肠杆菌生物标志物酶,并采用6-氯-4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖醛酸(6-CMUG)作为荧光底物。与常规快速GUS方法不同,该系统先裂解样品中的细菌并洗脱提取GUS,在无颗粒和完整细菌存在下直接测定提取酶的连续荧光动...

Creation of stable and strictly regulated enzyme switch for signal-on immunodetection of various small antigens.

Journal of bioscience and bioengineering 2019 Su J, Beh C, Ohmuro-Matsuyama Y, Kitaguchi T 等 6 人

本文报道了一种基于融合蛋白的均相免疫检测系统,用于小分子抗原的信号开启型检测。该系统以抗体可变区(VH/VL)作为识别元件,并分别连接界面突变β-葡萄糖醛酸酶(GUSm)作为报告酶;小分子抗原结合后诱导可变区二聚化,使原本无活性的GUSm二聚体进一步组装为活性四聚体,从而催化荧光底物产生荧光信号。此前GUSm因热稳定性差及可能由自发...

Rapid Detection of Escherichia coli via Enzymatically Triggered Reactions in Self-Reporting Chitosan Hydrogels.

ACS applied materials & interfaces 2015 Sadat Ebrahimi MM, Voss Y, Schönherr H

本文报道了一种用于快速原位检测细菌酶的自报告水凝胶。为实现大肠杆菌的膜基传感报告功能,在固体支撑上的壳聚糖水凝胶膜被赋予β-葡萄糖醛酸酶(β-GUS)报告功能,该酶由超过98%的已知大肠杆菌菌株分泌。通过酰胺键共价偶联荧光底物4-甲基伞酮基-β-D-葡萄糖醛酸苷(MUG)或互补比色底物4-硝基苯基-β-D-葡萄糖醛酸苷(PNPG),...