膜脂质在细胞膜双层中呈异质分布。在酿酒酵母中，面向胞质侧的二酰甘油（DAG）池从液泡膜到芽极化质膜两端富集，但其空间分布如何维持仍不清楚。本研究利用全基因组 DAG 荧光生物传感器筛选，鉴定了调控 DAG 空间分布的基因，富集于囊泡运输、脂质运输、磷脂和固醇代谢相关蛋白。部分突变体出现 DAG 主要错误定位至质膜，其中预测脂酶 Dr...
二酰甘油（DAG）是脂质合成与细胞信号转导的重要中间物，但传统生化分离会改变DAG池且浓度低，难以区分不同DAG池。本研究验证了一种遗传编码DAG生物传感器在活植物细胞中的应用。该传感器由黄色荧光蛋白（YFP）与蛋白激酶C的C1a结构域（C1aPKC）融合而成，可特异性结合DAG，并稳定表达于烟草BY-2细胞和拟南芥植株。共聚焦成像...
基于蛋白的荧光生物传感器可用于研究健康与疾病中的细胞信号转导，但在自动化实验室中的应用受到限制。作者开发了两种可在标准荧光酶标仪上稳定运行的活细胞检测体系，分别用于检测二酰甘油（DAG）和环磷酸腺苷（cAMP）。DAG 传感器采用 mNeonGreen 荧光蛋白与 DAG 结合域融合，经杆状病毒转导进入 HEK293T 细胞，在 G...
瞬时受体电位经典6（TRPC6）是一种阳离子选择性、二酰甘油（DAG）调节、钙离子通透通道，可由Gq蛋白偶联受体激动剂激活。TRPC6功能障碍与血管痉挛、肾小球硬化等心血管和肾脏疾病相关。当组胺H1受体（H1R）被激动剂刺激时，尽管激动剂持续存在，TRPC6活性仍衰减至基线。本研究利用HEK细胞表达系统和可同时检测胞内DAG与Ca2...
本研究开发了一种含铱纳米颗粒的一次性可丢弃生物传感器，用于二酰甘油（DG）的酶法测定。检测基于酶级联反应：脂肪酶将DG水解为甘油和脂肪酸，甘油激酶在ATP存在下将甘油转化为甘油-3-磷酸，甘油-3-磷酸氧化酶进一步氧化甘油-3-磷酸并产生过氧化氢。过氧化氢在相对于Ag/AgCl参比电极+0.5 V的固定电位下发生电化学氧化，氧化电流...