BMC biology
2020
Bouquier N, Moutin E, Tintignac LA, Reverbel A 等 14 人
mTOR 信号是细胞感知营养、生长因子和能量状态的关键通路。本文报道了一种高灵敏度的基因编码生物发光共振能量转移(BRET)生物传感器 AIMTOR,用于在活细胞中实时监测 mTORC1 活性。该传感器由 YPET 荧光受体、ULK1 衍生 T757 磷酸化底物肽、WW 结构域和 NanoLuc 生物发光供体组成,mTORC1 磷酸...
Redox biology
2020
Saeedi Saravi SS, Eroglu E, Waldeck-Weiermair M, Sorrentino A 等 7 人
过氧化氢(H2O2)调控血管内皮细胞关键磷酸化通路,并影响内皮型一氧化氮合酶(eNOS)信号。细胞内外 H2O2 均参与 eNOS 调控,但具体通路不清。本研究利用化学遗传学与活细胞成像,在 EA.hy926 人内皮细胞的胞质、核和小窝中生成并检测 H2O2。作者构建了靶向酵母 D-氨基酸氧化酶(DAAO)与新型 H2O2 生物传感...
Journal of molecular biology
2020
Huang Z, Ouyang M, Lu S, Wang Y 等 5 人
既往多种 Src 家族激酶生物传感器研究显示,细胞核内激酶活性明显低于胞质,提示核与胞质存在不同调控。本研究以 Fyn 为例,构建了带光诱导核定位信号的 Fyn FRET 生物传感器,证明 Fyn 激酶活性在核内显著低于胞质。为进一步理解 Fyn 与其磷酸酶在胞质和核内不同平衡状态的维持机制,作者又构建了融合光诱导核定位信号的 Fy...