Gradient method for accurate affinity determinations.
无标记相互作用分析所得亲和常数(kd、ka 和 KD)受传感器表面配体密度影响显著。本文提出一种基于 SPR 成像的新方法,在传感器表面构建配体密度梯度,使分析物响应可外推至 Rmax=0 μRIU。该方法利用质量传输限制区确定分析物浓度,避免为调节配体密度而进行繁琐优化,并最大限度降低再结合、强双相行为等表面依赖效应。方法可完全自...
无标记相互作用分析所得亲和常数(kd、ka 和 KD)受传感器表面配体密度影响显著。本文提出一种基于 SPR 成像的新方法,在传感器表面构建配体密度梯度,使分析物响应可外推至 Rmax=0 μRIU。该方法利用质量传输限制区确定分析物浓度,避免为调节配体密度而进行繁琐优化,并最大限度降低再结合、强双相行为等表面依赖效应。方法可完全自...
本文开发了一种新型双色全内反射荧光生物传感器(DTB),用于同时定量两种小分子及其与抗体的亲和常数。该传感器采用单-多模光纤耦合器替代复杂共聚焦光学系统,传输两路激发光并收集双色荧光;采用光电二极管替代光电倍增管,基于光纤开关的时间分辨效应同时检测两种荧光。紧凑光学结构减少了光学分离元件和严格光路对准,提高了光传输效率和检测灵敏度。...
亲和常数(kd、ka 和 KD)可通过固定化配体方法(如免疫分析和无标记生物传感器技术)测定。本文提出一种新的表面等离子共振(SPR)阵列成像方法,可获得可视为单生物分子相互作用最佳估计的亲和常数。该方法将不同配体密度和分析物浓度下测得的速率常数(kd、ka)及解离平衡常数(KD)外推至零响应水平(KD_R0),从而模拟仅一个配体分...