Model-Assisted Fine-Tuning of Central Carbon Metabolism in Yeast through dCas9-Based Regulation.

ACS synthetic biology 2019 Ferreira R, Skrekas C, Hedin A, Sánchez BJ 等 7 人

为在工业规模上生产高价值化学品，酿酒酵母的代谢工程需要广泛调控其代谢。本文鉴定了新的基因表达微调策略，以增强内源代谢通量，提高乙酰辅酶A和丙二酰辅酶A水平。将基于dCas9的转录调控与响应丙二酰辅酶A的胞内生物传感器结合，用于筛选有益调控组合。候选基因由基因组尺度代谢模型预测，并设计了靶向168个基因的gRNA文库。经多轮荧光激活细...

荧光生物传感器 丙二酰辅酶AFapRdCas9代谢工程

Optimizing Cell-Free Biosensors to Monitor Enzymatic Production.

ACS synthetic biology 2019 Pandi A, Grigoras I, Borkowski O, Faulon JL

无细胞系统是代谢工程和合成生物学中快速、高通量原型化生物部件的有前景平台。其主要限制之一是转录阻遏蛋白的抑制倍数较低，因此主要依赖阻遏蛋白的原核生物传感器开发受到限制。本研究展示如何在无细胞系统中优化此类生物传感器，包括采用含转录因子（TF）质粒的细胞制备 TF 掺杂裂解液、在加入报告 DNA 前对 TF 质粒进行预孵育，以及通过补...

荧光生物传感器 细胞无生物传感器D-psicose转录因子荧光报告基因