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Methods for Using a Genetically Encoded Fluorescent Biosensor to Monitor Nuclear NAD<sup/>.

Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) 2018 Cohen MS, Stewart ML, Goodman RH, Cambronne XA

游离烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)是NAD+消耗酶的底物,其局部浓度可影响PARP/ARTD和sirtuin等酶活性。本章介绍利用基因编码荧光生物传感器测量亚细胞区室NAD+浓度的方法,并讨论该传感器的局限性与潜在应用。内容包括:(1)基于磁珠的方法校准仪器与实验装置;(2)在细胞中设置必要对照并正确进行比率荧光测量;(3)采用适...

In vivo biosensors: mechanisms, development, and applications.

Journal of industrial microbiology & biotechnology 2018 Shi S, Ang EL, Zhao H

体内生物传感器能够识别并响应特定细胞刺激。近年来,生物传感器越来越多地用于代谢工程和合成生物学,因为它们可被整合到合成回路中,根据特定细胞刺激(如某种代谢物或pH变化)调控报告基因表达。天然传感装置种类繁多,通常可分为蛋白质型和核酸型两大类。二者既可直接从天然遗传元件中挖掘获得,也可通过工程化改造现有遗传元件以获得新的特异性或更优性...