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Single-Cell Activation of the cAMP-Signaling Pathway in 3D Tissues with FRET-Assisted Two-Photon Activation of bPAC.

ACS chemical biology 2020 Kinjo T, Watabe T, Kobachi K, Terai K 等 5 人

细菌光激活腺苷酸环化酶(bPAC)广泛用于信号转导研究,但其双光子吸收截面低,难以通过双光子激发高效激活。本研究利用单体青色荧光蛋白1(mTFP1)的高双光子吸收特性,基于FRET辅助光激活技术开发了可双光子激活的bPAC(2pabPAC),即mTFP1ΔC11与bPAC的融合蛋白。在2pabPAC中,mTFP1吸收870 nm双光...

Optogenetic Control for Investigating Subcellular Localization of Fyn Kinase Activity in Single Live Cells.

Journal of molecular biology 2020 Huang Z, Ouyang M, Lu S, Wang Y 等 5 人

既往多种 Src 家族激酶生物传感器研究显示,细胞核内激酶活性明显低于胞质,提示核与胞质存在不同调控。本研究以 Fyn 为例,构建了带光诱导核定位信号的 Fyn FRET 生物传感器,证明 Fyn 激酶活性在核内显著低于胞质。为进一步理解 Fyn 与其磷酸酶在胞质和核内不同平衡状态的维持机制,作者又构建了融合光诱导核定位信号的 Fy...

Booster, a Red-Shifted Genetically Encoded Förster Resonance Energy Transfer (FRET) Biosensor Compatible with Cyan Fluorescent Protein/Yellow Fluorescent Protein-Based FRET Biosensors and Blue Light-Responsive Optogenetic Tools.

ACS sensors 2020 Watabe T, Terai K, Sumiyama K, Matsuda M

基于 Förster 共振能量转移(FRET)的基因编码生物传感器已被用于可视化信号分子活性。目前大多数传感器由青色荧光蛋白和黄色荧光蛋白(CFP/YFP)组成,限制了在单个细胞内同时使用多种 FRET 传感器,且与蓝光驱动的光遗传工具不兼容。为克服这些问题,作者开发了具有红移激发和发射波长的 FRET 生物传感器。通过计算 För...