A Novel Aptamer Selection Strategy for
铜绿假单胞菌是临床重要且多重耐药的病原菌,亟需快速可靠的诊断方法。本研究建立了一种基于离心管的全细胞适配体筛选(SELEX)策略,将灭活铜绿假单胞菌细胞直接与单链DNA文库孵育,提高了结合适配体回收率并克服了微孔板法对细胞数量的限制。经10轮筛选和反向筛选,获得6个候选适配体;分子对接显示T1对目标菌脂多糖/共同多糖抗原具有最高选择...
铜绿假单胞菌是临床重要且多重耐药的病原菌,亟需快速可靠的诊断方法。本研究建立了一种基于离心管的全细胞适配体筛选(SELEX)策略,将灭活铜绿假单胞菌细胞直接与单链DNA文库孵育,提高了结合适配体回收率并克服了微孔板法对细胞数量的限制。经10轮筛选和反向筛选,获得6个候选适配体;分子对接显示T1对目标菌脂多糖/共同多糖抗原具有最高选择...
念珠菌属酵母菌可引起免疫受损者及健康人的胃肠道、泌尿道和呼吸道感染。近年来念珠菌病报告病例迅速增加,诊断研究备受关注。我们开发了一种基于多克隆适配体库的荧光检测方法,对念珠菌属具有较高特异性和亲和力,可高灵敏地定量临床样本中的病原菌。此前我们获得了可特异性识别念珠菌的适配体库 R10,并通过模拟念珠菌引起的早期皮肤感染模型,利用 F...
全细胞系统性指数富集配体进化(whole-cell SELEX)用于筛选特异性结合目标细胞的适配体。为鉴定金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus, S. aureus)特异性DNA适配体,本研究将快速全细胞SELEX应用于单链DNA文库,并通过结合流式细胞分选(FACS)与反向SELEX,设计、筛选并发展了两类适...
传统方法检测沙门氏菌等感染性病原菌步骤复杂,难以满足快速检测需求。生物传感器在病原菌快速检测中具有潜力,而适配体因分子小、易合成标记、免疫原性低、成本低于抗体且靶标特异性高,适合用于生物传感器分析。本研究以鼠伤寒沙门氏菌为靶标,肠炎沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为反靶标,采用全菌系统性指数富集配体进化(SELEX)筛选特异性单链...