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Gradient method for accurate affinity determinations.

Analytical biochemistry 2023 Schasfoort RBM

无标记相互作用分析所得亲和常数(kd、ka 和 KD)受传感器表面配体密度影响显著。本文提出一种基于 SPR 成像的新方法,在传感器表面构建配体密度梯度,使分析物响应可外推至 Rmax=0 μRIU。该方法利用质量传输限制区确定分析物浓度,避免为调节配体密度而进行繁琐优化,并最大限度降低再结合、强双相行为等表面依赖效应。方法可完全自...