为克服细胞间差异并有效评估生物网络中的信号传播，需要在单个活细胞中同时定量多个生物学可观测量。荧光生物传感器常用于监测蛋白相互作用和酶活性，但同步测量超过两个参数仍具挑战。本研究设计了三种光谱分离的各向异性 Förster 共振能量转移（FRET）生物传感器，以克服该困难。作者以凋亡刺激下外源、内源和效应半胱天冬酶（caspase ...
半胱天冬酶（caspases）通过蛋白水解活性介导凋亡性细胞死亡。当细胞内 caspase 被激活到现有技术可检测的水平时，通常认为随后会发生凋亡。然而，越来越多的证据表明，在正常健康细胞中，同一组 caspase 还具有其他功能，可能以较低酶活水平存在。非凋亡 caspase 活性的研究受到低水平 caspase 活性检测困难以及...
随着自然杀伤（NK）细胞疗法用于肿瘤治疗，亟需检测细胞死亡早期事件的新工具。作者将蛋白酶可裂解荧光素酶生物传感器技术应用于人 NK 细胞识别肿瘤细胞的活细胞体系，评估穿孔素依赖性与非依赖性死亡通路。通过 Fc 受体和 NK 激活受体介导的细胞间信号，15 分钟内即可测得荧光素酶信号。除已报道的半胱天冬酶可裂解传感器外，作者开发了颗粒...
细胞毒性T淋巴细胞（CTL）可通过穿孔素-颗粒酶B和Fas/FasL两条途径诱导靶细胞凋亡，但半胱天冬酶激活动力学长期难以实时监测。作者开发了一种基于圆形排列荧光素酶的新型生物传感器检测方法，将GloSensor（GLS）热稳定荧光素酶变体内部连接caspase 3/7切割位点DEVD或granzyme B/caspase 8切割位...