癌症生物标志物检测需要准确、高通量的工具，这对疾病诊断、监测和治疗至关重要。本研究建立了一种简单、快速的荧光酶联免疫吸附测定（FLISA）平台，采用荧光染料偶联的抗体片段（scFv）分别识别程序性死亡配体1（PDL1）和人表皮生长因子受体2（HER2）。通过优化抗原固定、封闭和荧光抗体反应等关键步骤，将总检测时间缩短至3小时，显著低...
工程抗体以提高靶标特异性、降低检测限或引入新功能，是生物传感器开发的重要方向。尽管已有多种亲和生物传感器可在不同分析物浓度下产生输出信号，但在复杂生物样品中实现可逆、连续的蛋白监测仍具挑战。本文探索利用定向进化调节高亲和抗表皮生长因子受体（EGFR）单链可变抗体片段（scFv）的解离动力学，从而在无标记结合检测中实现连续蛋白传感。研...
现场检测物质滥用是预防与干预方案实施中的重要手段。传统方法笨重、耗时且物流要求高，生物传感器因此具有简化物质滥用检测的潜力。本研究设计了一种功能化丝网印刷电极（SPE）电化学生物传感器，采用氧化钴纳米颗粒和单链抗体片段（scFv）检测可卡因。采用差分脉冲伏安法（DPV）、循环伏安法（CV）和电化学阻抗谱（EIS）考察传感器功能，并用...
本研究旨在设计一种功能阻抗生物传感器，利用凝集素作为糖链识别蛋白，对前列腺癌标志物前列腺特异性抗原（PSA）进行高特异性糖谱分析。传统方法将全长抗体固定于传感界面以捕获 PSA，再进行凝集素孵育；但全长抗体 Fc 区含糖链，凝集素可能直接结合固定抗体，造成假阳性并影响糖谱准确性。本文采用不含碳水化合物基团的重组单链抗体片段（scAb...
本文报道了一种用于水溶液中检测爆炸物2,4,6-三硝基甲苯（TNT）的选择性无标记生物传感器。该传感器以硅藻壳生物硅为发光基底，利用其与抗TNT单链抗体片段（scFv）共价偶联后形成的免疫复合物引起光致发光（PL）猝灭的原理进行信号读出。硅藻壳是硅藻壳壁形成的纳米多孔生物硅材料，在紫外激发下可发射强可见蓝光。作者从培养的海洋硅藻Pi...
本研究利用迭代亲和选择，从 Tomlinson I+J 噬菌体展示库中分离出特异性结合小分子生物标志物 L-肉碱（L-Carnitine）的单链抗体片段（scFv）克隆。L-肉碱是人类的条件必需营养素，尿液中异常升高与 2 型糖尿病、肺癌等疾病相关。ELISA 亲和表征显示，筛选得到的结合物在关键生物选择材料和密切相关 L-肉碱衍生...
肌红蛋白是急性心肌梗死早期生物标志物之一。作者近期筛选出一种对人肌红蛋白具有快速反应动力学的抗体，认为其属于体内免疫早期产生的早期IgG形式。本研究利用大肠杆菌表达和重折叠技术，制备该早产抗体的重组单链可变片段（scFv）。scFv基因由VH和VL序列经(Gly4Ser)3连接子连接构建；去除pelB前导序列后表达量高，但可溶性极低...
低成本、无创免疫分析可用于快速检测人体疾病。免疫分析的灵敏度和特异性高度依赖于高亲和力、抗原特异性抗体。抗体由生物体产生，其质量及是否适合用于免疫分析难以通过人为干预直接确定或控制。然而，利用基因工程和重组抗体技术，获得高质量抗体的过程已被缩短和简化。传统上依赖动物免疫可能需要数月甚至更长时间获得的抗体，如今可在数周内以细菌、酵母或...
本研究采用迭代亲和筛选（biopanning）策略，从 Tomlinson I+J 天然噬菌体展示库中筛选出多个可特异性识别并结合趋化因子单核因子诱导的干扰素γ蛋白（MIG/CXCL9）的单链 Fv（scFv）抗体片段克隆。MIG 是移植排斥过程中的重要趋化因子蛋白。作者通过 ELISA 亲和表征发现，筛选所得 scFv 在生物筛选...
IgE 是过敏性疾病的核心分子。本研究从抗人 IgE 小鼠单克隆抗体 mAb12 中分离重链和轻链可变区 cDNA，并在大肠杆菌中表达重组单链可变片段 ScFv12。质谱显示其分子量约 28 kDa，圆二色谱显示主要为 β 折叠。基于表面等离子共振的生物传感器研究表明，ScFv12 能迅速、稳定地结合人 IgE，解离常数 KD 为 ...
本文建立了一种利用BIAcore生物传感器从核糖体展示库中筛选高亲和力单链Fv抗体片段（scFv）的实验方案。以柑橘黄单胞杆菌柑橘致病变种（Xac）免疫小鼠脾脏mRNA构建的核糖体展示库为来源，将Xac脂多糖（LPS）固定于HPA疏水传感器芯片表面，使未纯化的scFv周质表达产物流过芯片，并依据解离速率常数（kd）选择亲和力改善的s...