Optimization of a genetically encoded biosensor for cyclin B1-cyclin dependent kinase 1.

Molecular bioSystems 2014 Belal AS, Sell BR, Hoi H, Davidson MW 等 5 人

基于荧光蛋白（FP）的生物传感器可实时监测活细胞内酶活性，但第一代 FRET 型激酶传感器通常荧光响应较低，优化过程费时费力。本文报道利用高通量大肠杆菌菌落筛选策略优化激酶 FRET 生物传感器。作者构建 pUADE 双表达质粒，在 Ptac 启动子下表达传感器变体，在 PBAD 启动子下表达组成型激酶；通过 L-阿拉伯糖诱导激酶表...

荧光生物传感器 FRET生物传感器cyclin B1-CDK1激酶活性荧光蛋白

A bacteria colony-based screen for optimal linker combinations in genetically encoded biosensors.

BMC biotechnology 2011 Ibraheem A, Yap H, Ding Y, Campbell RE

基于荧光蛋白（FP）的分子内 Förster 共振能量转移（FRET）生物传感器可在活细胞中可视化多种生化事件。构建此类传感器需要在两种不同颜色 FP 之间插入经过选择的分子识别元件。当识别元件与目标分析物相互作用并发生构象变化时，由于 FRET 效率改变，构建体的比率发射信号发生变化。此类传感器的灵敏度与比率发射变化成正比，因此迫...

荧光生物传感器 FRET生物传感器H3K27三甲基化大肠杆菌菌落筛选连接肽优化