Nature communications
2023
Englund E, Schmidt M, Nava AA, Klass S 等 9 人
I型模块化聚酮合酶（PKS）是像装配线一样工作的多结构域酶。过去三十年，人们尝试替换、删除和插入新功能结构域以产生新分子。然而，插入异源结构域常使 PKS 不稳定，导致活性丧失和蛋白错误折叠。为解决该挑战，本文开发了一种基于荧光的溶解度生物传感器，可快速识别结构破坏最小的工程 PKS 变体。利用该传感器，筛选了酰基转移酶（AT）交换...
Frontiers in microbiology
2023
Urbaniec J, Sanderson-Smith M, McFadden J, Hai FI 等 5 人
抗生素持久性（亚群耐受）指抗生素敏感菌中部分细胞在杀菌浓度抗生素长期暴露后存活，并在抗生素去除后可再生长，可导致疗程延长、感染复发和遗传耐药加速。目前尚无能在抗生素暴露前将耐受细胞从总体中分离的生物标志物。已有研究表明持久者常存在胞内氧化还原稳态紊乱，因此本研究采用 Peredox [NADH:NAD+] 荧光生物传感器，在单细胞水...
Frontiers in microbiology
2023
Han Q, Wang SF, Qian XX, Guo L 等 9 人
在大肠杆菌及相关菌中，鞭毛制动蛋白YcgR响应胞内升高的环二鸟苷酸（c-di-GMP），降低鞭毛旋转速度并偏向逆时针（CCW）旋转，从而调控细菌游动。此前关于c-di-GMP激活的YcgR直接结合马达蛋白MotA还是破坏转子蛋白FliG结构存在争议。本研究构建并优化了一种基于荧光共振能量转移（FRET）的YcgR生物传感器，将鼠伤寒...