Monitoring protein-small molecule interactions by local pH modulation.

我们开发了一种在体相水溶液中检测蛋白–小分子及蛋白–离子相互作用的技术。该方法将 pH 敏感荧光染料 5-(和-6)-羧基荧光素偶联到指定捕获蛋白表面的游离赖氨酸残基上。由于染料周围局部电场随配体结合而改变，其表观 pKa 发生变化，导致荧光强度改变；小分子结合和离子结合分别引起约 6% 和 15% 的荧光变化。该变化可源于分析物电...