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The regulation of β-adrenergic receptor-mediated PKA activation by substrate stiffness via microtubule dynamics in human MSCs.

Biomaterials 2014 Kim TJ, Sun J, Lu S, Zhang J 等 5 人

细胞机械微环境对细胞功能具有重要影响,基质刚度可指导干细胞分化,但其机制尚不清楚。本文报道,在人源间充质干细胞(HMSCs)中,基质刚度可调节细胞对β-肾上腺素受体(β-AR)激动剂异丙肾上腺素(ISO)的反应。基于荧光共振能量转移(FRET)的A激酶活性报告蛋白(AKAR2)显示,软基质上ISO诱导的蛋白激酶A(PKA)活性较低,...

Specific in vivo labeling of tyrosinated α-tubulin and measurement of microtubule dynamics using a GFP tagged, cytoplasmically expressed recombinant antibody.

PloS one 2013 Cassimeris L, Guglielmi L, Denis V, Larroque C 等 5 人

GFP标记蛋白常被用作研究蛋白定位与功能的生物传感器,但GFP结构域可能干扰蛋白性质。胞内重组抗体(scFv)可间接标记蛋白,但多数抗体片段在胞质还原环境中不溶。作者从合成超稳定人源scFv文库中筛选出抗微管蛋白scFv 2G4,其以GFP融合蛋白形式在哺乳动物细胞中可溶。本文报道利用2G4-GFP在固定和活细胞中标记微管。结果显示...