抗体在固体表面的固定广泛用于免疫分析、生物传感器和亲和层析，但固定稳定性与取向仍是挑战。自组装蛋白层可通过直接沉积涂覆不同表面，利用基因工程表达融合蛋白可形成自固定抗体功能层。本研究构建了融合蛋白，将平菇 I 类真菌疏水蛋白 Vmh2 的自组装粘附特性与两种抗海洋毒素单链可变片段（ScFv）的识别功能结合。所选 ScFv 分别识别与...
本研究将抗负调节因子（anti-NEF）单链抗体（scFv）通过自动展示技术表达于大肠杆菌外膜，并用于检测 NEF。作者分别采用荧光激活细胞分选（FACS）竞争免疫测定、酶联免疫吸附（ELISA）比色免疫测定和表面等离子共振（SPR）生物传感器评估其结合活性。随后，利用谷胱甘肽（GSH/GSSG）氧化外膜上展示的 anti-NEF ...
单克隆抗体G2特异性结合鸡朊病毒蛋白来源免疫原肽Pep18mer，以及另外两种鸡蛋白来源肽Pep8和Pep395；G2对Pep18mer的结合亲和力相近。三种肽氨基酸序列完全不同，因此G2的识别机制独特而有趣。我们构建了G2的单链Fv（scFv）抗体，并通过抗原结合功能证明其正确折叠，功能与完整G2抗体相似。同时构建了轻链第95位含...
本文报道一种新型双组分荧光平台，利用抗体支架的高亲和力和选择性捕获并激活小分子荧光原。作者研究单一单链抗体对多种青素族荧光原的多选择性激活，通过荧光筛选鉴定出三种细胞不可通透荧光原，分别具有蓝、绿、红独特发射光谱和纳摩尔级亲和力。将该抗体作为蛋白融合标签连接至 G 蛋白偶联受体后，生物传感器保留完整活性，在活细胞表面产生明亮荧光且背...
军团菌是广泛存在于自然和人工水系统中的革兰阴性菌，人吸入含菌气溶胶后可感染肺泡巨噬细胞，引发军团病。由于军团菌普遍存在且危害健康，饮用水中军团菌浓度必须严格监测，但标准方法仍依赖耗时的培养与形态分析。本研究首次从人源 naïve HAL 抗体库通过噬菌体展示获得抗 L. pneumophila 抗体，并在完整细菌细胞上筛选，以选择特...
本研究通过遗传改造硅藻 Thalassiosira pseudonana，使其表达靶向生物硅的融合蛋白，包括增强型绿色荧光蛋白（EGFP）或带四半胱氨酸标签（Cy3TAG）的单链抗体。研究重点考察两类位点特异性结合：一是细胞可穿透荧光双砷探针 AsCy3 与 Cy3TAG 标记融合蛋白的结合；二是高、低分子抗原——炭疽杆菌表面层蛋白...
本研究开发了一种基于氢化非晶硅（a-Si:H）光电二极管的微流控生物传感器芯片，用于定量检测 HIV-1 病毒颗粒感染因子（Vif）。芯片集成 23 个 200 μm×200 μm 的 a-Si:H PIN 光电二极管和 a-SiC:H 滤光层，可将 605 nm 荧光转换为光电流，同时阻挡 405 nm 激发光。微流控 PDMS ...
GFP标记蛋白常被用作研究蛋白定位与功能的生物传感器，但GFP结构域可能干扰蛋白性质。胞内重组抗体（scFv）可间接标记蛋白，但多数抗体片段在胞质还原环境中不溶。作者从合成超稳定人源scFv文库中筛选出抗微管蛋白scFv 2G4，其以GFP融合蛋白形式在哺乳动物细胞中可溶。本文报道利用2G4-GFP在固定和活细胞中标记微管。结果显示...
蛋白磷酸化是细胞内信号转导的关键事件，能够特异性识别目标蛋白特定磷酸化位点的荧光生物传感器对细胞生物学研究和药物筛选具有重要价值。波形蛋白（vimentin）是最丰富的中间丝蛋白，其特定丝氨酸残基在细胞周期依赖方式下发生磷酸化，磷酸化会改变蛋白结构与功能特性，进而影响细胞生物学性质。本文报道利用新型荧光生物传感器 Quenchbod...
Sortase A介导的蛋白连接是一种源自金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白展示机制的生物学共价偶联系统，需要三种组分：纯化的SrtA酶、含LPXTG识别序列的底物和寡甘氨酸受体分子。本文从亲本抗EGFR单克隆抗体528克隆其单链Fv片段sc528，并在C端引入LPETGG标签序列。利用重组SrtA，作者成功将GGG-生物素连接至sc528。...
本文报道一种新型无试剂荧光生物传感器策略，其原理是抗体结构域上荧光团的淬灭效应随抗原结合而被解除。作者利用无细胞翻译介导的位置特异性蛋白标记系统，将荧光团定点引入抗体单链可变区（scFv）N端，发现 N端标记的 scFv 在结合抗原后出现显著荧光增强。以羧基四甲基罗丹明（TAMRA）标记的抗骨钙素 scFv 为模型，通过突变分析发现...
牛乳腺炎是奶牛业重大挑战，早期诊断对降低产量损失、提高奶质和控制成本至关重要。N-乙酰-β-D-氨基己糖苷酶（NAGase）在乳腺炎症时释放入奶，可作为乳腺炎早期指标。本文从人源Tomlinson单链可变片段（scFv）抗体文库中筛选抗NAGase scFv，并将其用于自动化光学生物传感器免疫分析以检测牛奶中NAGase。经噬菌体展...
本文报道一种用于检测并定量深静脉血栓（DVT）生物标志物D-二聚体（D-dimer）的快速灵敏方法。该免疫传感器以固定于换能器表面的单链抗体（ScAb）为识别元件，形成致密受体层。检测基于接枝于聚吡咯骨架上的N-α-双(羧甲基)-L-赖氨酸（ANTA）/Cu2+复合物的氧化还原活性。所得杂化材料聚吡咯/ANTA/金属配合物/His-...
本文报道了一种基于生物素化单链可变片段（Sc-Fv）抗体固定在共聚丙烯吡咯膜上的无标记电化学生物传感器。该免疫传感器通过生物素/链霉亲和素体系，将生物素化单链抗体固定在电聚合聚吡咯共聚物膜上，首次实现了高效抗原检测。传感器响应通过表面等离子共振（SPR）和差分脉冲伏安法（DPV）对聚吡咯氧化还原信号的电化学分析进行监测。共聚物由吡咯...
单链抗体（scFv）是由免疫球蛋白重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）通过柔性肽链连接子连接而成的工程蛋白。本研究对从酵母表面展示文库中分离的多个 scFv 荧光激活蛋白（FAP）的单个 VH 或 VL 域活性进行了表征，考察其结合环境敏感荧光染料并使其发荧光的能力。结果显示，许多 scFv 需要 VH 和 VL 两个域共同作用才...
本文报道了一种用于快速、特异性检测炭疽芽孢的生物识别元件制备策略。作者以炭疽杆菌表面层蛋白EA1为靶标，从免疫小鼠脾细胞构建单链抗体（scFv）库，并采用标准非竞争生物筛选和竞争生物筛选两种方法筛选抗EA1 scFv。非竞争筛选获得的scFv虽能识别炭疽杆菌EA1，但与其他芽孢杆菌属物种的S层蛋白存在交叉反应。竞争筛选则利用其他芽孢...