Real-time analysis of cleavage and religation activity of human topoisomerase 1 based on ternary fluorescence resonance energy transfer DNA substrate.

人拓扑异构酶1B（hTop1）是一种普遍存在且必需的酶，通过松弛超螺旋DNA的拓扑状态支持DNA复制、转录等基本代谢过程。其催化循环包括DNA切割与再连接两个步骤。本研究开发了一种基于连接三个荧光团的自杀DNA底物的三元荧光共振能量转移（FRET）生物传感器，用于同时监测hTop1的切割和再连接催化功能。荧光团标记不改变酶对DNA底...