Proximity Binding Assay for PROTAC Ternary Complex Analysis.
本文报道了一种用于 PROTAC 三元复合物分析的邻近结合检测(proximity binding assay, PBA)。PROTAC 或分子胶通过桥接两个蛋白形成三元复合物,是靶向蛋白降解的前提,但在药物发现中同时分析这些相互作用仍具挑战。该检测在生物传感器表面同时测量二元和三元相互作用动力学:目标蛋白和泛素 E3 连接酶底物结...
本文报道了一种用于 PROTAC 三元复合物分析的邻近结合检测(proximity binding assay, PBA)。PROTAC 或分子胶通过桥接两个蛋白形成三元复合物,是靶向蛋白降解的前提,但在药物发现中同时分析这些相互作用仍具挑战。该检测在生物传感器表面同时测量二元和三元相互作用动力学:目标蛋白和泛素 E3 连接酶底物结...
石房蛤毒素(STX)具有麻痹和致死毒性,亟需简便分析方法。本研究开发了一种以氧化石墨烯(GO)为荧光猝灭剂的核酸适配体生物传感器用于STX检测。GO与STX核酸适配体M30-f(5′端修饰5-羧基荧光素FAM)结合,在激发408 nm、发射515 nm条件下产生荧光。基于荧光共振能量转移(FRET)原理,M30-f的荧光被GO猝灭。...
Förster共振能量转移(FRET)生物传感器基于供体与受体荧光团之间的非辐射能量转移,通过荧光强度、FRET效率或荧光寿命的变化实现生物分子检测,具有高灵敏度、高特异性和实时监测优势。本综述系统总结了FRET生物传感器在细胞成像、药物发现、病原检测和癌症诊断中的最新进展,涵盖供体–受体对优化、单分子FRET、荧光寿命成像、pH/...
微小RNA(miRNAs)在过敏性鼻炎(AR)免疫细胞分化与免疫应答调控中发挥关键作用,miRNA-155在AR发病中显著上调,可作为AR诊断标志物。基于上转换纳米颗粒(UCNPs)的荧光传感器虽已用于miRNA检测,但聚合物包覆、表面钝化与DNA功能化仍具挑战。本研究将发夹DNA1(H1)通过磺酰胺键修饰到UCNPs表面的聚磺酸薄...
嵌合抗原受体(CAR)T细胞疗法已革新癌症治疗。当CAR的单链可变片段(scFv)域与肿瘤抗原结合时,CAR在免疫突触(IS)处激活,使T细胞直接杀伤癌细胞。本文报道一种基于荧光共振能量转移(FRET)的新型IS生物传感器,用于实时评估CAR-IS结构及信号能力。该传感器由靶向间皮素(MSLN)的CAR scFv、CD3ζ信号域、供...
过去几年,DNA折纸技术凭借DNA分子无可比拟的自组装能力取得显著进展。作为高度可编程、可寻址且生物相容的纳米材料,DNA折纸已在细胞支架构建、抗菌药物递送和超分子酶组装等生物医学领域得到广泛应用。为拓展其应用场景,研究者开发了能够主动识别并定量报告靶标的DNA折纸结构。光学DNA折纸生物传感器因使用快速、灵敏且易于实施而具有前景,...
血液是法医调查中常见的生物流体,具有重大证据价值。现有血液初筛试验常缺乏特异性且破坏样品,可能影响下游分析。本研究探索开发用于检测人红细胞(RBCs)的光学生物传感器,以克服上述局限。适配体生物传感器(aptasensor)因对目标分析物具有高特异性和亲和力而成为有前景的替代方案。适配体是短单链DNA或RNA序列,可形成稳定三维结构...
Lamin A 丝氨酸22位点(Ser22)的广泛磷酸化(pSer22)是细胞有丝分裂的标志,可促进核膜解体;在间期,pSer22 lamin A 丰度较低,并参与力学转导、病毒感染和基因表达。已有大量证据表明,磷酸化修饰调控 lamin A 对细胞功能与命运的作用,但目前尚缺乏用于实时观察 pSer22 lamin A 动态变化的...
FRET(荧光共振能量转移)生物传感器用于特异性检测生物分子或微环境变化。FRET是激发态供体荧光分子向邻近受体荧光分子的非辐射能量转移过程。在FRET生物传感器中,供体和受体通常为荧光蛋白、量子点(QDs)或小分子荧光团,并被设计处于近距离。当目标生物分子存在时,会引起供体与受体间距离变化,从而改变FRET效率及受体荧光强度,该荧...
在大肠杆菌及相关菌中,鞭毛制动蛋白YcgR响应胞内升高的环二鸟苷酸(c-di-GMP),降低鞭毛旋转速度并偏向逆时针(CCW)旋转,从而调控细菌游动。此前关于c-di-GMP激活的YcgR直接结合马达蛋白MotA还是破坏转子蛋白FliG结构存在争议。本研究构建并优化了一种基于荧光共振能量转移(FRET)的YcgR生物传感器,将鼠伤寒...
揭示DNA双链断裂(DSBs)的时空动态对理解DNA损伤与修复至关重要。传统方法依赖γH2AX和DNA损伤应答(DDR)因子,通过抗体免疫染色、Western blot、ELISA等生化检测,但难以在活细胞中实时、可靠地可视化和定量DSB活性。本文开发了一种基于荧光共振能量转移(FRET)的新型DNA双链断裂生物传感器(DSBS),...
石墨烯及其衍生物因优异的光学、电学和物理性质在生物传感中具有重要潜力,尤其具有宽谱可调吸收、荧光猝灭/爆发和强偏振相关效应,可实现生物分子的非破坏性检测。本文综述了石墨烯、氧化石墨烯(GO)、还原氧化石墨烯(rGO)和石墨烯量子点(GQDs)的制备方法与表面功能化策略,并总结基于石墨烯及其衍生物的光学生物传感器研究进展。文章归纳了表...
本文报道了一种以贻贝为碳源、通过水热法绿色合成氮掺杂碳点(CDs)的简便策略,并系统评价了140、160和180 ℃反应温度下CDs的化学结构、形貌与光学性能。随着反应温度升高,CDs平均粒径由2.06 nm降至1.30 nm,荧光量子产率由5.78%提高至15.20%,表面富含羟基、氨基和羧基,因而具有良好水溶性、生物相容性和抗光...
玉米中赭曲霉毒素A(OTA)污染因分布广、毒性高而备受关注,中国及欧盟等已制定玉米中OTA最大残留限量。基于纳米颗粒的荧光共振能量转移(FRET)检测快速灵敏,但常需复杂信号放大或特殊纳米颗粒形貌,不利于快速检测。本研究提出一种简单策略提高FRET适配体传感器灵敏度:将DNA四面体用于金纳米棒(AuNRs)FRET适配体传感器,DN...
自首个基于荧光共振能量转移(FRET)的钙指示剂Cameleon问世以来,多种遗传编码生物传感器(GEB)被用于在活细胞中时空分辨地监测离子浓度、细胞状态和酶活性等生理参数。FRET依赖供体与受体荧光蛋白间光谱重叠和非辐射能量转移,当传感域与目标分子相互作用引起构象变化时,供体-受体距离改变,从而改变FRET效率。现有GEB优化常需...
肝细胞癌(HCC)是中国癌症相关死亡的第二大原因,糖萼蛋白-3(Glypican-3, GPC3)是 HCC 的特异性抗原和可靠临床标志物。本文设计了一种基于荧光共振能量转移(FRET)的高灵敏均相荧光适配体传感器用于 GPC3 检测。以巯基修饰的 GPC3 适配体标记金碳点(AuCDs-GPC3Apt)作为荧光供体,磁性氧化石墨烯...
基于DNA的生物传感器技术在化学与生物检测中具有重要潜力,并已被积极开发用于活细胞和动物体内的分子成像探针,可在复杂生物体系中原位检测分析物、阐明关键分子在生物过程中的作用,并推动无创诊断和影像引导手术的发展。然而,提高成像的时空精度仍是该领域面临的挑战。本迷你综述阐述了将工程化光激活DNA生物传感器与上转换纳米技术相结合,实现时空...
上转换纳米颗粒(UCNPs)在体外蛋白传感中已取得显著成功,适配体是常用于修饰纳米颗粒进行蛋白检测的生物分子。然而,UCNPs 与 DNA 修饰过程复杂,且 DNA 骨架磷酸基团易吸附于 UCNPs 表面,限制了实际应用。为克服这些限制,本文提出一种基于聚多巴胺包覆上转换纳米颗粒(UCNPs@PDA)的无修饰荧光生物传感器。该传感器...
伏马菌素(FB)是玉米、小麦、燕麦及其相关产品中常见的真菌毒素,其中FB1含量最高,可造成严重食品污染并危害公共健康,因此亟需高灵敏检测方法。本研究基于上转换纳米粒子(UCNPs)与氧化石墨烯(GO)之间的荧光共振能量转移(FRET),结合催化发夹组装(CHA)靶标循环与信号放大,构建了用于FB1检测的新型荧光生物传感器。当样品中存...
计算方法可显著辅助核酸荧光实验,既能提供研究体系构象与相互作用的原子级细节,也能准确模拟基本参数。基于荧光的光学生物传感器在严重疾病临床诊断中具有高特异性潜力,许多设计依赖 Förster 共振能量转移(FRET)。目前实验方法依赖若干理论假设,这些假设会根本影响结果。若获得详细的原子级概览或重要模拟参数,可改善对计算的理解并给出更...