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An amplification-free CRISPR-Cas12a assay for titer determination and composition analysis of the rAAV genome.

Molecular therapy. Methods & clinical development 2024 Yu L, Zhou Y, Shi XC, Wang GY 等 7 人

重组腺相关病毒(rAAV)基因组滴度是基因治疗产品临床给药、生产和质量分析的关键指标。qPCR 和 dPCR 虽常用于 rAAV 基因组定量,但受扩增效率、标准品一致性和仪器平台差异影响,准确性和稳健性有限。CRISPR-Cas12a 生物传感器已用于病毒检测,但尚未见用于基因治疗产品滴度测定的报道。本研究开发并优化了一种无扩增 C...

Multiplexed efficient on-chip sample preparation and sensitive amplification-free detection of Ebola virus.

Biosensors & bioelectronics 2017 Du K, Cai H, Park M, Wall TA 等 12 人

本文开发并评估了一种用于埃博拉病毒检测的自动化微流控样品制备多路复用器(SPM)。该装置利用微阀控制的计量气泡改善磁珠与溶液的混合,从而增强目标埃博拉病毒RNA与固定在磁珠上的捕获探针之间的杂交。方法采用热稳定的4-甲酰苯甲酰胺功能化(4FB)磁珠替代链霉亲和素包被磁珠,并以高密度捕获探针提高靶标捕获效率。结合SPM的片上浓缩协议和...