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Utilizing FRET-based Biosensors to Measure Cellular Phosphate Levels in Mycorrhizal Roots of

Bio-protocol 2025 Zhang S, Jurgensen L, Harrison MJ

丛枝菌根(AM)真菌与植物形成共生关系,影响植物磷酸盐(Pi)吸收途径、代谢和根细胞生理。尽管 Pi 作用重要,其在菌根根中的分布与响应动态仍缺乏实时细胞水平监测。传统 Pi 测定方法难以实现活体单细胞动态成像。随着共聚焦显微镜定量成像和遗传编码荧光传感器的发展,细胞内 Pi 浓度实时成像成为可能。其中,基于荧光共振能量转移(FRE...

Quantitative Imaging of FRET-Based Biosensors for Cell- and Organelle-Specific Analyses in Plants.

Microscopy and microanalysis : the official journal of Microscopy Society of America, Microbeam Analysis Society, Microscopical Society of Canada 2016 Banerjee S, Garcia LR, Versaw WK

基因编码的Förster共振能量转移(FRET)生物传感器可用于报告离子和小分子相对浓度、蛋白构象变化、翻译后修饰及蛋白相互作用,通常通过荧光强度比率分析定量。本文以拟南芥中检测无机磷酸盐(Pi)的FRET生物传感器cpFLIPPi-6.4m为例,建立了基于共聚焦显微镜的比率成像定量方法。作者对供体eCFP、受体cpVenus及FR...

Imaging Cellular Inorganic Phosphate in Caenorhabditis elegans Using a Genetically Encoded FRET-Based Biosensor.

PloS one 2015 Banerjee S, Versaw WK, Garcia LR

无机磷酸盐(Pi)在代谢、细胞信号和能量转换中具有核心作用,动物体内 Pi 的分配必须与膳食供给及不同细胞代谢需求紧密协调。为全面理解 Pi 转运与回收机制,需要具有空间和时间分辨率的 Pi 动态监测方法。本文展示了一种遗传编码的 FRET 型 Pi 传感器在秀丽隐杆线虫中的应用。该传感器在不同细胞和组织中表达,包括头部神经元、尾部...

Structural prediction of a rhodamine-based biosensor and comparison with biophysical data.

Physical chemistry chemical physics : PCCP 2013 Gonçalves MB, Dreyer J, Lupieri P, Barrera-Patiño C 等 8 人

本文针对此前报道的一种用于检测无机磷酸盐(Pi)的蛋白荧光生物传感器进行结构预测。该传感器以大肠杆菌磷酸结合蛋白(PBP)为支架,并在 A17C 和 A197C 突变位点共价连接两个四甲基荧光素(RHO)荧光团。作者采用经典分子动力学和 Car–Parrinello/分子力学(CP/MM)混合模拟,分别构建无 Pi 和有 Pi 状态...