基于CRISPR/Cas的诊断方法具有高度特异性，但依赖荧光标记探针和复杂核酸提取流程，限制了现场应用。为此，本文开发了一种无标记、免设备的检测平台，整合FTA卡核酸提取、CRISPR/Cas12a识别和预折叠G-四联体（G4）–硫黄素T（ThT）信号报告系统。该平台利用G4与ThT的结构结合产生可见荧光，避免昂贵的荧光标记；FTA...
四苯乙烯（TPE）及其衍生物作为聚合诱导发光（AIE）荧光探针，已广泛用于化学成像、生物传感和医学诊断。现有研究多集中于通过分子修饰和功能化增强AIE荧光发射强度，而AIE发光体与核酸之间的相互作用研究较少。本文研究了氨基功能化TPE（TPE-Am）与单链DNA的相互作用。结果表明，TPE-Am与DNA可形成复合物，导致AIE分子荧...
本文报道了一种基于 G-四链体/硫黄素 T 复合物的无标记荧光适配体传感器，用于检测胰蛋白酶。利用 SELEX 筛选的细胞色素 c 特异性 DNA 适配体，加入细胞色素 c 后，适配体与其结合，空间位阻抑制硫黄素 T 与适配体 G-四链体区结合，使荧光降低；当存在胰蛋白酶时，胰蛋白酶将细胞色素 c 水解为小肽片段，解除位阻并暴露 G...
四环素类是一类具有共同四环骨架的重要抗生素，目前多用于动物，但其向环境泄漏及食品残留引发健康担忧。适配体是检测四环素类的有吸引力方法，此前报道的适配体均通过固定靶分子获得。本研究以土霉素（OTC）为靶标，采用固定 DNA 文库的捕获 SELEX 策略筛选 DNA 适配体，获得与已有序列无重叠的新适配体。代表性序列 OTC5 经等温滴...
微小RNA（miRNA）是疾病诊断、预后及药物开发中极具前景的分子生物标志物。本文报道了一种低背景、无标记的适配体生物传感器，用于基于孔雀石绿（MG）RNA调控荧光检测miRNA。在该策略中，目标miRNA与DNA延伸模板特异性杂交，形成T7体外转录系统；随后转录扩增产生大量MG RNA适配体（MGA）。MGA结合MG并限制其振动去...
基于 DNA 的逻辑电路设计已成为 DNA 纳米技术中的活跃研究方向，在智能生物分析中具有巨大潜力。尽管已有多种 DNA 逻辑系统被实现，但高级逻辑功能的构建仍具挑战，尤其是采用简单且均质的组成。本工作通过整合 G-四链体和 i-motif 两种 DNA 四重体结构，建立了一个完全无标记、高可扩展性的逻辑平台，并在其上实现了一系列高...
细胞色素c（Cyt c）是线粒体电子传递链和细胞凋亡过程中的重要生物标志物。本文构建了一种基于近红外（NIR）Ag2S量子点（QDs）的无标记荧光检测策略，用于灵敏、选择性检测Cyt c。在该体系中，Cyt c首先被胰蛋白酶水解，生成的血红素-肽片段具有过氧化物酶样活性，可催化H2O2分解产生羟基自由基（·OH）。在咖啡酸存在下，·...
本文提出一种基于级联趾端介导链置换反应（TMSDRs）和非酶目标循环放大策略的无标记荧光生物传感器，用于 HIV-1 基因检测。体系中，HIV-1 基因与三链 DNA 底物探针（SP）末端趾端区结合，触发链置换，释放辅助链（HS）并暴露新的趾端区；燃料链（FS）随后与暴露趾端区杂交，同时释放目标 DNA 和含富 G 序列的信号链（S...
砷离子是环境中广泛存在的有害重金属，砷污染已成为威胁人类健康和生态环境的严重问题，因此开发灵敏可靠的水中As3+检测方法具有重要意义。本文设计了一种无标记荧光传感平台，用于As3+监测，采用外切酶III（Exo III）辅助的级联目标循环放大策略。该平台以三螺旋分子开关作为传感元件，以2-氨基-5,6,7-三甲基-1,8-萘啶（AT...
针对G-四链体荧光探针多限于管式检测的问题，本文提出一种基于酶促生成G-四链体的原位无标记荧光生物成像方法，用于在细胞和组织水平检测凋亡细胞，即末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）激活的从头G-四链体合成（TAGS）检测。该方法的检测对象是凋亡的生化标志——基因组DNA断裂。TAGS利用DNA双链断裂（DSBs）作为引物，在富G未标记dN...
可逆蛋白质乙酰化是重要的翻译后修饰，主要由组蛋白乙酰转移酶（HATs）和组蛋白去乙酰化酶（HDACs）催化。本文建立了一种无标记荧光均相检测方法，用于检测 HAT/HDAC 活性及其抑制剂。该方法基于 G-四联体（G4）与乙酰化相关肽之间的静电相互作用，引起 G4/硫黄素 T（ThT）复合物荧光强度显著变化。HAT（p300）活性检...
本文报道了一种基于悬垂适配体的无标记荧光三磷酸腺苷（ATP）适配体传感器。该传感器由富含鸟嘌呤的DNA发夹（GHP）和带5'/3'悬垂序列的ATP适配体组成。无ATP时，适配体5'悬垂序列覆盖GHP的3'凹陷末端，通过空间位阻抑制外切酶III（exo III）对GHP的非特异性切割，从而显著降低背景噪声。存在ATP时，ATP诱导适配...
本研究构建了一种无标记DNA Y型连接体传感平台，用于双酚A（BPA）的超灵敏放大检测。该平台巧妙结合趾端介导链置换反应与III型外切酶（Exo III）信号保护策略。以三个发夹DNA探针为构建模块，通过一系列趾端介导链置换反应实现级联信号放大，形成DNA Y型连接体结构。首次将Exo III用作保护剂，使Y形双链DNA分子结构保持...
本文报道了一种以低成本、快速、简便方式实现的无标记荧光复合探针，用于DNA杂交检测。该探针基于芘功能化聚[2-(N,N-二甲基氨基)乙基甲基丙烯酸酯]（PFP）的芘激基态向SYBR Green I（SG）的荧光共振能量转移（FRET）机制。探针由带正电的PFP、DNA嵌入染料SG和带负电的单链DNA（ssDNA）组成。加入互补链后，...
凝血酶及其抑制剂的快速、灵敏检测对疾病诊断和药物研发具有重要意义。本文报道了一种基于未修饰 CdTe 量子点（QDs）聚集行为的新型生物传感器，用于检测凝血酶活性及其抑制。凝血酶的阳离子底物肽 S-peptide（GGLVPRGSCC-NH2）可通过巯基结合到 CdTe QDs 表面，部分中和其表面负电荷，诱导 QDs 聚集，导致荧...
本文提出一种基于结构转换适配体（SSAs）、SYBR Gold 和外切酶 I 的无标记荧光传感策略，用于检测无机离子、蛋白质和小分子等广泛目标。该方法利用目标结合后 SSAs 折叠形成 G-四链体或 Y 形等二级结构，使其比未折叠单链状态更耐核酸酶消化这一现象。核酸酶反应后残留适配体的量与目标浓度成正比，而 SYBR Gold 只能...