本研究针对高疏水性有机磷（OP）农药检测难题，采用丙酮对聚磷菌（PAOs）进行驯化，以开发基于微生物来源酶的疏水有机磷生物传感器。通过三步培养与驯化，在多种 PAOs 中仅杆状细菌存活。将驯化 PAOs 释放的胞外酶经硫酸铵盐析、透析膜处理及 DEAE-Sepharose FF 阴离子交换柱纯化，成功分离出两种酶组分。两种酶均对对硝...
本研究结合原位自由基聚合与非共价吸附，构建新型生物无机催化界面并研究组装机制。先用 N-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺（NAS）将有机磷水解酶（OPH）赖氨酸残基接枝丙烯酰基，再在室温下通过自由基聚合在酶表面生长可渗透聚合物壳，形成蛋白纳米胶囊（nOPH10）；随后纳米胶囊通过静电、氢键等非共价作用组装到氧化石墨烯（GO）表面，形成双固定化酶...
本文报道了一种用于微创经皮检测有机磷（OP）化学毒剂的微针电化学生物传感器。该传感器将有机磷水解酶（OPH）的高效生物催化作用与空心微针修饰的碳糊阵列电极换能器相结合，通过方波伏安法（SWV）快速测定OPH在OP底物存在下水解生成的对硝基酚（p-nitrophenol）。与固定电位OPH安培生物传感器相比，扫描电位SWV换能模式提供...
本文报道了一种用于水体系中快速、灵敏、选择性监测对硝基苯基取代有机磷农药（OPs）的新型生物传感器。该传感器基于由弹性蛋白样多肽-有机磷水解酶融合蛋白（ELP-OPH）、牛血清白蛋白（BSA）、二氧化钛纳米纤维（TiO2NFs）和羧基功能化多壁碳纳米管（c-MWCNTs）组成的功能纳米复合材料。ELP-OPH利用ELP的温度触发相变...
本研究开发了一种用于检测有机磷农药残留的酶生物传感器。该传感器由一对丝网印刷碳电极（SPCE）组成，其中一个电极表面通过壳聚糖膜固定化有机磷水解酶（OPH），并使用戊二醛进行交联。电极面积分别优化为3、5和7 mm²。OPH从假单胞菌（Pseudomonas putida）中分离，采用硫酸铵沉淀法纯化，得到浓度为6444 ppm的酶...
本研究从 Brevundimonas diminuta 中提取并纯化有机磷水解酶（OPH），将其以戊二醛为偶联剂共价固定于化学活化的聚氯乙烯（PVC）反应烧杯内表面，构建用于检测有机磷农药的电化学生物传感器。PVC 化学惰性、耐腐蚀且易成型，可作为电化学反应池并固定酶。碳纳米管（CNT）糊状工作电极用于在 +0.8 V 下进行安培测...
本文报道一种基于玻璃碳电极（GCE）修饰有序介孔碳（OMCs）和细胞表面表达有机磷水解酶（OPH）的新型电化学微生物生物传感器（OPH-bacteria/OMCs/GCE），用于快速监测对硝基苯基取代有机磷（OPs）化合物。利用新鉴定的冰核蛋白 N 端作为锚定基序，构建表面展示突变 OPH（S5）的工程化大肠杆菌菌株，该突变酶具有更...
当前微芯片、生物燃料电池和生物传感器等应用要求将酶有效且牢固地固定于固体表面。金结合多肽（GBP）是一种基因设计肽，能与金表面发生独特而特异相互作用，从而提高酶的稳定性与活性。本文报道了一种面向生物传感器应用的固定策略：通过金结合多肽融合有机磷水解酶（GBP-OPH）与金纳米颗粒修饰的化学修饰石墨烯（Au-CMG）之间的位点特异性相...
本研究将重组大肠杆菌全细胞通过戊二醛交联固定在丝网印刷碳电极（SPCE）上，构建用于检测甲基对硫磷的微生物生物传感器。重组大肠杆菌在周质区高表达有机磷水解酶（OPH），可将甲基对硫磷水解为对硝基酚（PNP）和二甲硫磷酸。扫描电镜（SEM）证实细胞成功固定于电极表面。将固定化SPCE与循环伏安（CV）联用，记录甲基对硫磷水解前后的伏安...
报道了一种新型、易再生的纳米复合界面，基于层状自组装（LbL）的阳离子/阴离子碳纳米管生物聚合物层。提出简单方法制备由氧化多壁碳纳米管（MWNT）交替层组成的纳米结构，其上分别固定阳离子酶有机磷水解酶（OPH，MWNT-OPH）或阴离子DNA（MWNT-DNA）。碳纳米管具有大比表面积、高长径比和优良导电性，可在界面可靠固定酶并促进...
为检测既用作农药又用作神经毒剂的有机磷化合物，开发了一种基于有机磷水解酶（OPH）的新型生物传感器。以介孔碳（MC）和炭黑（CB）作为阳极修饰层，可显著提高传感器对有机磷水解酶反应产物对硝基苯酚（PNP）的灵敏度。与碳纳米管（CNT）修饰电极相比，MC/CB/玻璃碳（GC）层表现出更强的安培响应，因为它促进了酶促生成的酚类化合物（P...
本文报道了一种基于固定化有机磷水解酶（OPH）的安培型生物传感器，用于快速、灵敏、低成本地检测有机磷（OP）神经性毒剂。该传感器将 OPH 与 Nafion 共固定于丝网印刷碳厚膜电极表面，在 OP 底物存在时，OPH 催化其水解生成对硝基酚（p-nitrophenol），随后对释放的对硝基酚进行快速阳极电化学检测。安培信号与水解底...