本研究开发了一种基于级联i-motif的可逆电化学阻抗策略，用于pH和末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）分析。该策略利用TdT在脱氧胞苷三磷酸（dCTP）存在下催化5′-巯基DNA修饰金电极表面3′-OH末端延伸，生成足够长的富含胞嘧啶（C）DNA。中性条件下，TdT生成的C-rich DNA保持不规则单链状态；酸性条件下，部分C质子化...
本研究开发了一种基于卡那霉素（KAN）、磁性微球-卡那霉素（MBs-KAN）与适配体之间竞争性识别，以及末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）介导信号放大策略的快速灵敏比色生物传感器。在无 KAN 时，适配体特异性识别 MBs-KAN；TdT 可在适配体 3′-OH 末端无模板延伸寡核苷酸，并将生物素-dUTP 掺入生成的长单链 DNA（s...
本研究构建了一种用于DNA检测的高灵敏、高特异性电化学生物传感器。该传感器利用外切酶III（Exo III）辅助的双重循环放大与toehold介导的链置换循环放大，实现目标DNA的三重循环扩增，从而在电极表面产生大量Y形DNA结构。随后采用末端脱氧核苷酸转移酶（TDT）介导的级联信号放大策略，催化生物素-dUTP反复掺入Y形DNA的...
沙门氏菌是广泛分布且危害严重的食源性致病菌，现场快速确认其存在具有重要意义。本研究构建了一种无标记、级联放大可视化生物传感器，用于敏感、快速检测鼠伤寒沙门氏菌。该传感器基于RDTG原理，即重组酶聚合酶扩增（RPA）、双链特异性核酸酶（DSN）切割、末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）延伸和G-四链体输出。首先提取沙门氏菌DNA，通过RPA...
本文报道了一种由末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）启动的片上信号放大方案，用于蛋白的高灵敏荧光检测。研究设计两种凝血酶结合适配体，通过形成三明治结构提高特异性。首先将氨基修饰适配体 TBA29 固定于硅芯片表面；捕获凝血酶后，第二种适配体 TBA15 结合到凝血酶的第二个结合位点，使 TBA15 的 3'端暴露于芯片表面。随后，在 Td...
电化学方法可实现酶活性的快速、低成本分析。本文基于末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）介导的延伸策略，建立了一种简单高效的“信号开启”电化学检测方法，用于无标记、灵敏地检测 DNA 相关酶活性。TdT 是一种无模板依赖的 DNA 聚合酶，可催化脱氧胸苷三磷酸（dTTP）在单链 DNA（ssDNA）3′-OH 末端连续添加；由此生成的 T ...
本文报道了一种表面声波（SAW）DNA生物传感器，通过协同利用表面质量效应实现人血清中信号放大且序列特异性的DNA检测。该传感界面将酶介导的DNA延伸反应（同时贡献粘弹性和质量分量）与原位银纳米颗粒合成（贡献质量分量）相结合，构建了具有协同质量负载的SAW检测平台。当靶DNA与表面固定的捕获探针杂交后，其暴露的3'-OH末端在末端脱...
既往基于原位聚合的电化学 DNA 生物传感器表明，末端脱氧核苷酸转移酶（TdTase）具有良好信号放大能力，但其背景信号受 TdTase 用量影响显著，易产生假阳性且稳定性较差。本文首次提出一种基于 TdTase 介导延伸 grafting-to 模式的新型电化学 DNA 生物传感器。该方法先在均相溶液中利用 TdTase 将 dA...
本文建立了一种基于氧化石墨烯（GO）负载的末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）生成的富含胞嘧啶 DNA 纳米尾模板银纳米团簇（DNA-AgNCs）独特电催化活性的无标记电化学检测策略。TdT 可在无模板条件下催化脱氧胞苷三磷酸（dCTP）连接到单链 DNA（ssDNA）的 3′-OH 末端；随后在 Ag(I) 存在下，TdT 生成的富含 ...
蛋白生物标志物的特异性高灵敏检测在生物医学和生物分析中具有重要意义。本文建立了一种基于催化发夹组装（CHA）与末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）介导的原位DNA聚合双信号放大策略，用于人血清中凝血酶的无标记电化学检测。目标凝血酶结合固定探针上的适配体序列后，使发夹结构展开并捕获大量带有游离3′-OH末端的信号发夹探针。随后，TdT在dG...