Genetically Encoded, Noise-Tolerant, Auxin Biosensors in Yeast.
生长素是调控植物、细菌、真菌和动物生长、代谢与行为的重要信号分子，其中吲哚-3-乙酸（IAA）是最主要的天然生长素，也影响微生物定殖植物或动物的能力。理解真菌中生长素的合成与信号传导，有助于调控从农业土壤到人体肠道的跨界关系和微生物组。然而，真菌中尚缺乏具有高时空分辨率的生长素测量工具。本研究报道了一套用于模式酵母酿酒酵母（Sacc...
Application of FRET-Based Biosensor "ATeam" for Visualization of ATP Levels in the Mitochondrial Matrix of Living Mammalian Cells.
基于 Förster 共振能量转移（FRET）的遗传编码生物传感器是活细胞成像的重要工具。作者团队此前开发了名为 ATeam 的 FRET 型 ATP 指示剂，用于在单个活细胞内可视化 ATP 水平，并进一步实现线粒体基质中 ATP 的实时监测。ATeam 由供体荧光蛋白、ATP 感应域和受体荧光蛋白组成，ATP 结合诱导感应域构象...
Multiplex imaging of Rho family GTPase activities in living cells.
本文提供了在单通道和多通道成像模式下对Rho家族GTPase生物传感器进行活细胞成像的实验程序。多通道方法可在单个活细胞中直接同时可视化两种生物传感器读数。作者以基于CFP/YFP FRET的RhoA生物传感器和基于溶剂极性敏感有机染料的Cdc42生物传感器为例，系统列出实现双比率型生物传感器成像所需的光学组件、滤光片、二向色镜、分...