Genetically Encoded Biosensors Based on Fluorescent Proteins.
基于荧光蛋白(FP)的遗传编码生物传感器能够在活细胞和活体中实时监测分子动力学,对理解复杂细胞过程的正常功能与调控至关重要。根据待监测分子事件类型,需采用不同传感策略以优化 FP 生物传感器设计。本文综述了基于 FP 的遗传编码生物传感器及其多种策略,包括荧光蛋白转位、荧光共振能量转移(FRET)、二聚化依赖型荧光蛋白(ddFP)、...
基于荧光蛋白(FP)的遗传编码生物传感器能够在活细胞和活体中实时监测分子动力学,对理解复杂细胞过程的正常功能与调控至关重要。根据待监测分子事件类型,需采用不同传感策略以优化 FP 生物传感器设计。本文综述了基于 FP 的遗传编码生物传感器及其多种策略,包括荧光蛋白转位、荧光共振能量转移(FRET)、二聚化依赖型荧光蛋白(ddFP)、...
G蛋白偶联受体(GPCR)在质膜上被胞外信号激活,随后内化并脱敏;但部分GPCR内化后仍保持活性。以β2肾上腺素能受体2(B2AR)为例,其内体运输过程可持续数小时,然而该过程中B2AR活性的时空特征尚未阐明。本研究利用基于荧光共振能量转移(FRET)的B2AR生物传感器,以及靶向不同内体运输阶段的cAMP报告蛋白,在单个囊泡水平实...
DNA甲基化是哺乳动物最主要的表观遗传修饰,通过转录后调控基因表达参与胚胎发育、基因组印记、细胞分化和X染色体失活等基本过程。异常的DNA甲基化与肺癌、肝癌、乳腺癌等多种疾病密切相关,因此准确、灵敏地检测DNA甲基化对表观遗传研究和疾病诊断具有重要意义。近年来,研究者开发了多种新型生物传感器用于高灵敏检测DNA甲基化,但尚缺乏对体外...
蛋白激酶控制细胞功能的几乎所有环节,这些关键信号节点整合多条通路输入以调节复杂生理过程,异常激酶信号与多种疾病相关。虽然荧光蛋白生物传感器通过在活细胞中直接、时空精确地测量激酶活性而革新了激酶信号研究,但仍需更强健的分子工具在不同实验场景中追踪激酶活性动态。本文报道了一种经高通量连接肽库筛选获得的第二代超灵敏激发比率型蛋白激酶A(P...