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Advancements in G protein-coupled receptor biosensors to study GPCR-G protein coupling.

British journal of pharmacology 2023 Olsen RHJ, English JG

酶促与细胞信号生物传感器用于解析复杂生物系统的活性。针对G蛋白偶联受体(GPCR)——人体中药物靶点最丰富的蛋白家族——的监测传感器种类繁多,在用途、形式和功能上差异显著,其应用不断拓展了人们对这一重要蛋白家族的理解。本文简要总结该领域中日益重要的一个子集:用于测量受体偶联与选择性的转导器生物传感器,重点介绍用于测量受体与异源三聚体...

综述或非传感器论文 GPCR生物传感器G蛋白偶联BRETFRET

The Use of Yeast in Biosensing.

Microorganisms 2022 Dhakal S, Macreadie I

酵母是最简单的单细胞真核生物,安全、易培养,并保留几乎所有高等真核生物(包括人类)的基本细胞过程,因此被广泛用作疾病模型和生物传感平台。本文综述酵母在生物传感中的应用,重点总结其作为全细胞生物传感器对多种刺激的响应机制。酵母具有遗传保守、基因组易于改造、分析方法可及等特点,并能在线粒体缺陷条件下存活,因而适合构建灵活的全细胞传感系统...

Spatiotemporal Characterization of GPCR Activity and Function during Endosomal Trafficking Pathway.

Analytical chemistry 2021 Kim H, Lee HN, Choi J, Seong J

G蛋白偶联受体(GPCR)在质膜上被胞外信号激活,随后内化并脱敏;但部分GPCR内化后仍保持活性。以β2肾上腺素能受体2(B2AR)为例,其内体运输过程可持续数小时,然而该过程中B2AR活性的时空特征尚未阐明。本研究利用基于荧光共振能量转移(FRET)的B2AR生物传感器,以及靶向不同内体运输阶段的cAMP报告蛋白,在单个囊泡水平实...

Combining Optical Approaches with Human Inducible Pluripotent Stem Cells in G Protein-Coupled Receptor Drug Screening and Development.

Biomolecules 2018 Bourque K, Jones-Tabah J, Mnasri N, Martin RD 等 5 人

G蛋白偶联受体(GPCR)药物发现正处于关键节点。传统筛选多依赖人胚肾293(HEK293)等异源细胞模型,但这类模型难以充分反映目标细胞、组织和整体动物中的生理与病理背景。当前研究正逐步转向更具相关性的细胞、组织切片和整体动物平台,并发展可在单细胞水平解析信号事件的分析方法。光学生物传感器能够实时追踪受体激活、G蛋白偶联、β-ar...

综述或非传感器论文 GPCR生物传感器iPSCFRETBRET

Mini G protein probes for active G protein-coupled receptors (GPCRs) in live cells.

The Journal of biological chemistry 2018 Wan Q, Okashah N, Inoue A, Nehmé R 等 7 人

G蛋白偶联受体(GPCRs)是调控细胞功能的关键信号蛋白。本研究显示,mini G(mG)蛋白是稳健探针,可用于多种检测格式报告活细胞中GPCR活性。mG蛋白是工程化Gα亚基GTPase结构域,最初用于活性GPCR结构研究。共聚焦成像显示,融合荧光蛋白的mG蛋白弥散分布于胞质,并在细胞表面和细胞内细胞器的受体激活位点转位。与荧光蛋白...

GPCR-Based Chemical Biosensors for Medium-Chain Fatty Acids.

ACS synthetic biology 2015 Mukherjee K, Bhattacharyya S, Peralta-Yahya P

微生物化学生产常依赖低通量色谱检测,许多非显色化合物难以高通量筛选。本文利用哺乳动物细胞中可结合中链脂肪酸的 G 蛋白偶联受体(GPCR),在酿酒酵母中快速构建全细胞化学生物传感器。中链脂肪酸是高级生物燃料脂肪酸甲酯的直接前体。所构建的传感器可检测偶数 C8–C12 脂肪酸,激活后信号提高 13–17 倍,线性范围可达 250 μM...

A generic microfluidic biosensor of G protein-coupled receptor activation-monitoring cytoplasmic [Ca(2+)] changes in human HEK293 cells.

Biosensors & bioelectronics 2013 Roelse M, de Ruijter NC, Vrouwe EX, Jongsma MA

表达重组G蛋白偶联受体(GPCR)的细胞被特异性配体激活后,胞质钙离子浓度会在30–60秒内短暂升高并恢复基线。黄色Cameleon 3.6(YC3.6)是遗传编码钙指示剂,可与GPCR共表达,通过Förster共振能量转移(FRET)实时监测胞质钙变化。作者据此设计通用GPCR激活微流控生物传感器原型,在表达神经激肽1受体(NK1...