The Use of Yeast in Biosensing.
酵母是最简单的单细胞真核生物，安全、易培养，并保留几乎所有高等真核生物（包括人类）的基本细胞过程，因此被广泛用作疾病模型和生物传感平台。本文综述酵母在生物传感中的应用，重点总结其作为全细胞生物传感器对多种刺激的响应机制。酵母具有遗传保守、基因组易于改造、分析方法可及等特点，并能在线粒体缺陷条件下存活，因而适合构建灵活的全细胞传感系统...
Exploring G protein-coupled receptors and yeast surface display strategies for viral detection in baker's yeast: SARS-CoV-2 as a case study.
病毒感染给医疗体系和全球经济带来沉重负担，准确诊断是有效治疗与控制的关键。生物传感器已作为可及且准确的检测手段用于多种重要病毒，但多数基于无细胞物理或化学相互作用；活体微生物在病毒检测中潜力尚未充分开发。基于细胞的生物传感器因通用性和经济性受到重视，然而酵母平台用于病毒诊断仍局限于间接抗体识别。本文提出一种在酿酒酵母中检测病毒的新策...
Display of Microbial Glucose Dehydrogenase and Cholesterol Oxidase on the Yeast Cell Surface for the Detection of Blood Biochemical Parameters.
高血糖常伴随胆固醇异常等多种并发症，因此糖尿病慢病管理中同时监测血糖和胆固醇水平很重要。本研究利用酵母表面展示系统，将米曲霉TI来源的葡萄糖脱氢酶（Gdh1）和色杆菌DS-1来源的胆固醇氧化酶（Cho1）分别高拷贝展示于酿酒酵母细胞表面。随后将上述酵母细胞固定于电极上，构建两种全细胞生物传感器，用于葡萄糖和胆固醇的电化学检测。葡萄糖...
Redesigning of Microbial Cell Surface and Its Application to Whole-Cell Biocatalysis and Biosensors.
微生物细胞表面展示技术可通过在细胞表面展示功能蛋白和肽来重新设计细胞表面，从而赋予细胞独特功能。外源肽或蛋白与锚定蛋白融合后，经分泌途径转运至细胞外并固定于表面，可有效避免底物/产物转运限制、酶纯化和酶不稳定等问题。细菌和酵母表面展示系统分别是最常用的原核和真核蛋白表面展示系统，已广泛应用于疫苗、生物催化、生物传感器、生物吸附和多肽...
Development of a Protease Biosensor Based on a Dimerization-Dependent Red Fluorescent Protein.
基质蛋白酶（matriptase）活性失调是侵袭性肿瘤生长、癌症转移和骨关节炎的重要贡献因素。检测和定量matriptase活性及抑制的方法将是有用的工具。为此，作者开发了一种基于二聚化依赖红色荧光蛋白（ddRFP）报告系统的matriptase敏感蛋白生物传感器。在该平台中，两个相邻蛋白结构域通过蛋白酶敏感连接肽连接，组装时产生荧...
Electrochemical Glucose Biosensor Based on Glucose Oxidase Displayed on Yeast Surface.
传统酶基生物传感器通常需要将纯化酶通过化学或物理方式固定在电极表面，这一过程常导致酶活性损失、固定比例随时间下降，且成本较高。酵母表面展示技术可直接利用真核细胞表面展示重组蛋白的全细胞催化剂，为替代纯化酶提供了经济可行的途径。本文详细介绍了葡萄糖氧化酶（GOx）在酿酒酵母（S. cerevisiae）细胞表面的展示方法，并基于该酵母...
Yeast surface displaying glucose oxidase as whole-cell biocatalyst: construction, characterization, and its electrochemical glucose sensing application.
本研究成功利用α-凝集素作为锚定基序，将葡萄糖氧化酶（GOx）展示于酿酒酵母细胞表面。免疫化学分析与酶学分析表明，具有活性的GOx被高效表达并转运至细胞表面。与传统GOx相比，展示GOx的酵母细胞（GOx-yeast）表现出优良的酶学性质：在宽pH范围（pH 3.5–11.5）内稳定性良好，热稳定性高（52 °C下保留超过94.8%...
scFv-based fluorogen activating proteins and variable domain inhibitors as fluorescent biosensor platforms.
单链抗体（scFv）是由免疫球蛋白重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）通过柔性肽链连接子连接而成的工程蛋白。本研究对从酵母表面展示文库中分离的多个 scFv 荧光激活蛋白（FAP）的单个 VH 或 VL 域活性进行了表征，考察其结合环境敏感荧光染料并使其发荧光的能力。结果显示，许多 scFv 需要 VH 和 VL 两个域共同作用才...
Antibody affinity optimization using yeast cell surface display.
许多生物传感器依赖分子识别试剂实现高灵敏、高特异检测，而识别试剂的亲和力与特异性往往决定仪器最终性能。抗体因能高亲和、高特异结合多种抗原，被广泛用作生物传感器识别元件。重组体外抗体展示技术，尤其是酵母细胞表面展示，可在保留其他性质的同时增强特定抗体属性。本章介绍一种基于酵母表面展示的抗体亲和力成熟方案：从杂交瘤细胞分离 VH 和 V...
Biosensor detection systems: engineering stable, high-affinity bioreceptors by yeast surface display.
本文介绍利用酵母表面展示技术对生物传感器中的生物受体进行定向进化，以获得更稳定、更高亲和力的配体结合分子。生物传感器通常由识别配体的生物受体和将结合事件转换为可测信号的换能器组成；其中受体的结合强度、特异性和稳定性直接决定检测灵敏度、重复使用能力和长期储存性能。作者以酿酒酵母 EBY100 和 pCT302/pYD1 展示载体为基础...