Surface Display Technology for Biosensor Applications: A Review.
表面展示是一种重组技术,可将目标蛋白表达并锚定在细胞膜表面,适用于从病毒到哺乳动物细胞的几乎所有生物实体。该技术已用于药物筛选、生物催化剂、文库筛选、定量分析和生物传感器等多种生物技术与生物医学应用。本综述讨论表面展示技术在生物传感器中的应用,具体介绍噬菌体展示、革兰氏阴性与革兰氏阳性细菌表面展示以及真核酵母细胞表面展示系统。综述描...
表面展示是一种重组技术,可将目标蛋白表达并锚定在细胞膜表面,适用于从病毒到哺乳动物细胞的几乎所有生物实体。该技术已用于药物筛选、生物催化剂、文库筛选、定量分析和生物传感器等多种生物技术与生物医学应用。本综述讨论表面展示技术在生物传感器中的应用,具体介绍噬菌体展示、革兰氏阴性与革兰氏阳性细菌表面展示以及真核酵母细胞表面展示系统。综述描...
以假单胞菌 Pseudomonas borealis DL7 的冰核蛋白(INP)为锚定基序、大肠杆菌麦芽糖结合蛋白(MBP)为增溶增强子,将日本晴水稻细胞分裂素氧化酶 OsCKX4 成功展示于大肠杆菌细胞表面。展示 OsCKX4 的细菌可直接固定于电极表面,用于选择性检测细胞分裂素,从而省去酶提取和纯化步骤。在 pH 7.0 磷酸...
微生物细胞表面展示技术可通过在细胞表面展示功能蛋白和肽来重新设计细胞表面,从而赋予细胞独特功能。外源肽或蛋白与锚定蛋白融合后,经分泌途径转运至细胞外并固定于表面,可有效避免底物/产物转运限制、酶纯化和酶不稳定等问题。细菌和酵母表面展示系统分别是最常用的原核和真核蛋白表面展示系统,已广泛应用于疫苗、生物催化、生物传感器、生物吸附和多肽...
本文报道了一种基于细菌表面展示谷氨酸脱氢酶(Gldh-bacteria)的新型 L-谷氨酸生物传感器。以冰核蛋白(INP)N 端区域为锚定基序,在大肠杆菌(E. coli)表面表达 NADP+ 依赖型 Gldh。细胞分级实验和 SDS-PAGE 分析表明,大部分 INP-Gldh 融合蛋白位于细胞表面。传感器通过依次在玻碳电极(GC...
本研究首次构建了以冰核蛋白(INP)为锚定基序、在大肠杆菌表面展示葡萄糖脱氢酶(GDH)的工程菌株。SDS-PAGE、Western blot和酶活测定证实融合蛋白定位于细胞表面且保持功能,INP不影响GDH辅因子结合域;细胞裂解液中74.6%的GDH活性位于外膜。与胞内表达GDH的粗酶液相比,GDH展示菌在pH 6–10、40 ℃...
构建了一种新型 Nafion/细菌表面展示木糖脱氢酶(XDH)/多壁碳纳米管(MWNTs)复合膜修饰电极,用于灵敏、选择性测定 D-木糖(INS 967)。XDH 展示细菌以新鉴定的 Pseudomonas borealis DL7 冰核蛋白作为锚定基序制备,可直接使用,省去酶提取纯化,提高酶稳定性。优化条件:将 10 μL 均匀 ...