Glutamate dehydrogenases in fungi: From biology to biotechnology.
谷氨酸脱氢酶(GDH;EC 1.4.1.2 和 EC 1.4.1.4)通过催化 2-酮戊二酸与 L-谷氨酸的可逆转化,在真菌氮代谢中发挥关键作用。在真菌中,NAD 依赖型和 NADP 依赖型 GDH 位于氨同化与谷氨酸分解代谢的交叉点,参与生长、分化和形态发生。真菌适应并占据不同生态位的进化与其 GDH 功能调控、亚细胞定位及生化特...
谷氨酸脱氢酶(GDH;EC 1.4.1.2 和 EC 1.4.1.4)通过催化 2-酮戊二酸与 L-谷氨酸的可逆转化,在真菌氮代谢中发挥关键作用。在真菌中,NAD 依赖型和 NADP 依赖型 GDH 位于氨同化与谷氨酸分解代谢的交叉点,参与生长、分化和形态发生。真菌适应并占据不同生态位的进化与其 GDH 功能调控、亚细胞定位及生化特...
谷氨酸是发酵产生的非必需氨基酸,在疾病诊断和食品安全中具有重要作用,实时监测其浓度对健康与营养管理意义重大。由于谷氨酸难以直接发生电化学氧化还原反应,本研究利用谷氨酸脱氢酶(GLDH)与纳米孔金(NPG)的协同作用,通过测量酶促反应生成的 NADH 量,实现 50–700 µM 范围内谷氨酸的间接准确检测。所构建的 GLDH-NPG...
本文通过电沉积和电聚合制备了 SPEC/AuNPs/PMB 修饰电极,并用循环伏安法研究了还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)在修饰电极表面的电化学行为。将一定量底物与谷氨酸脱氢酶(GLDH)涂覆于修饰电极表面,形成功能酶膜,通过测量反应中 NADH 的消耗间接计算水样中的氨氮。结果表明,电催化电流信号强度提高两倍,催化氧化电位负...
本研究构建了一种用于检测铵离子(NH4+)的新型伏安电化学生物传感器。将谷氨酸脱氢酶(GLDH)/四氧化三铁纳米球(Fe3O4 NSs)/石墨烯(GR)/壳聚糖(CS)纳米生物复合材料固定于玻璃碳电极(GCE)表面。在该电极上,GLDH催化α-酮戊二酸(α-KG)的还原胺化与L-谷氨酸的氧化脱氨可逆反应,酶反应产生的电子通过[Fe(...
为开发便携、稳定、灵敏且低成本的疟疾检测系统,以满足疟疾高发发展中国家的有效筛查需求,本文报道了一种基于适配体的场效应晶体管(aptaFET)生物传感器。该传感器采用扩展栅极场效应晶体管与互指金微电极(IDµE)构建,用于检测血清中疟疾生物标志物恶性疟疾谷氨酸脱氢酶(PfGDH)。研究使用90 nt单链DNA适配体NG3特异性捕获目...
便捷且灵敏的α-酮戊二酸(α-KG)检测方法对生物医学诊断和微生物发酵工业具有重要意义。本文通过超声剥离和电化学还原制备还原二硫化钼纳米颗粒(rMNs),并在其表面电化学沉积金纳米颗粒(AuNPs),构建 rMNs-Au nano 纳米复合修饰玻璃碳电极(rMNs-Au nano-GCE)。该电极对还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD...
艰难梭菌感染(CDI)的快速准确诊断对治疗、感染控制和流行病学监测至关重要。谷氨酸脱氢酶(GDH)作为重要抗原,被提出作为 CDI 初筛靶标,但现有基于 GDH 活性或免疫检测的方法敏感性和特异性不足。本文报道了针对 GDH 的单链 DNA 适配体的筛选与表征。经 10 轮 SELEX 筛选后,利用高通量测序鉴定富集的适配体候选序列...
本文报道了一种用于食品和临床样品中谷氨酸测定的无试剂丝网印刷安培生物传感器。谷氨酸脱氢酶(GLDH)和辅因子烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)被完全整合到 Meldola’s Blue 丝网印刷碳电极(MB-SPCE)表面。生物组分通过未纯化多壁碳纳米管(MWCNTs)与壳聚糖(CHIT)混合后,以层层滴涂方式固定在 MB-SPCE ...
本文报道了一种基于细菌表面展示谷氨酸脱氢酶(Gldh-bacteria)的新型 L-谷氨酸生物传感器。以冰核蛋白(INP)N 端区域为锚定基序,在大肠杆菌(E. coli)表面表达 NADP+ 依赖型 Gldh。细胞分级实验和 SDS-PAGE 分析表明,大部分 INP-Gldh 融合蛋白位于细胞表面。传感器通过依次在玻碳电极(GC...
本文报道了一种基于氮掺杂金刚石纳米线(N-DNW)薄膜的电化学生物传感器,用于水溶液和人尿中尿素的定量检测。N-DNW 电极先在 H2SO4/HNO3(3:1)混合酸中 200 °C 煮沸 2 h 进行湿化学氧化,以去除石墨并引入羧基和羟基。随后利用 EDC 和 NHS 活化 N-DNW 表面羧基,将脲酶(Urs)和谷氨酸脱氢酶(G...
本文报道了基于光刻法制备垂直排列碳纳米管纳米电极阵列(VACNT-NEA)并研究碳纳米管密度对电极性能的影响。通过电化学阻抗谱和循环伏安法表征不同扩散机制,所制备阵列呈现由径向扩散主导的稳态电流和S形循环伏安曲线。将VACNT-NEA和高密度VACNTs用作无介质电化学谷氨酸生物传感器,谷氨酸脱氢酶(GLDH)共价连接在碳纳米管尖端...
多层石墨烯(MLG)因具有极高的二维电导率和大比表面积,是电化学传感与生物传感的潜在材料。本文提出一种低毒、可重复且简便的方法,仅使用浓硫酸/硝酸将多壁碳纳米管(MWCNTs)大规模转化为功能化多层石墨烯。电子显微镜结果证实 MLG 的形成,傅里叶变换红外光谱(FTIR)和 X 射线光电子能谱(XPS)数据表明其具有羧基和羟基功能化...
本文报道了一种基于谷氨酸脱氢酶/垂直排列碳纳米管(GLDH/VACNTs)的高灵敏谷氨酸生物传感器。垂直排列碳纳米管通过直流等离子体增强化学气相沉积(DC-PECVD)法在硅基底上生长,并用循环伏安法和电化学阻抗谱表征其电化学行为。谷氨酸脱氢酶通过 EDC/sulfo-NHS 共价偶联到 VACNTs 端部。采用循环伏安法和差分脉冲...
本文报道了一种基于碳纤维电极(CFE)的快速、高灵敏微型安培生物传感器,用于检测α-酮戊二酸(α-KG)。该传感器通过在单根碳纤维表面电化学共沉积钌(Ru)和铑(Rh)纳米颗粒,并固定谷氨酸脱氢酶(GLUD)构建。SEM和EDX表征表明,Ru/Rh纳米颗粒均匀覆盖碳纤维表面,粒径约100–250 nm。混合Ru/Rh涂层对还原型烟酰...
本文报道了一种基于谷氨酸脱氢酶(GLDH)固定于壳聚糖膜的光学生物传感器,用于水样中铵离子的测定。传感器膜通过旋涂法沉积在玻璃片上。检测基于在α-酮戊二酸存在下,GLDH催化铵离子与NADH反应,使NADH被氧化为NAD+,并在340 nm波长处监测吸光度变化。传感器在pH 8时活性最佳;壳聚糖浓度和酶负载量分别以2%(w/v)和0...
本文报道了一种基于还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)电催化氧化的高灵敏安培法 L-谷氨酸生物传感器。该传感器以劳氏紫(又称硫堇,Th)/多壁碳纳米管(MWCNTs)复合膜修饰金电极,复合膜同时作为电子介体和酶固定基质。将谷氨酸脱氢酶(GLDH)固定于 Th-MWCNTs 表面后,传感器对谷氨酸表现出快速响应(约 3 s)、低检出...
本文报道了一种基于硫堇/单壁碳纳米管(Th–SWNTs)纳米复合物的谷氨酸(glutamate)生物传感器。该传感器以 Th–SWNTs 作为电子介体和酶固定基质,将谷氨酸脱氢酶(GlDH)固定于其表面。在酶促反应中,谷氨酸被氧化为 α-酮戊二酸并生成还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH),NADH 在修饰电极上发生电催化氧化,产生...
本研究利用纳米结构碳吸附剂色谱法,从小麦和玉米的灌浆籽粒中分离出一种由磷脂酰肌醇(PI)和谷氨酸脱氢酶(GDh)组成的磷脂酰肌醇–蛋白纳米复合物。该复合物无需去垢剂、磷脂酶或其他处理即可表现出 NADP-GDh 活性,且整体结构保持完整,因此适合作为生物传感器使用。其突出特点是对氨离子具有高度敏感性,氨离子线性响应范围为 0.5 μ...
本文报道了从嗜热菌 Thermus thermophilus 中克隆、表达并固定化一种新型重组谷氨酸脱氢酶(GDH)。T. thermophilus 基因组中含有两个编码推定 GDH 的基因,其中 TTC1211 基因被克隆并在大肠杆菌中过表达。纯化后的酶为三聚体,能够以 NAD+ 或 NADP+ 为辅因子催化 L-谷氨酸氧化生成 ...
本文设计了一种新型多组分杂化材料,将量子点(CdS)和谷氨酸脱氢酶(GDH)自组装到多壁碳纳米管(CNTs)上,用于安培生物传感系统。Zeta电位和透射电镜分析证实,CdS/GDH在羧基功能化CNTs上均匀生长。与单一CdS相比,所得杂化材料在光照下产生光电流更高效。入射光激发CdS产生载流子,CNTs促进电荷转移。对于脱氢酶型生物...