R103 and R115 Affinity Mutants of ATeam ATP Biosensors.
三磷酸腺苷(ATP)在细胞外、胞质和分泌囊泡等生理环境中可从纳摩尔变化到毫摩尔,既是能量载体、磷酸供体,也是嘌呤能信号分子。为覆盖如此宽的浓度范围,需要具有不同亲和力的基因编码传感器。本研究针对 ATeam 系列 ATP 生物传感器 ATP 结合域中的两个关键精氨酸残基 R103 和 R115 进行定点突变,系统考察电荷中和(R-t...
三磷酸腺苷(ATP)在细胞外、胞质和分泌囊泡等生理环境中可从纳摩尔变化到毫摩尔,既是能量载体、磷酸供体,也是嘌呤能信号分子。为覆盖如此宽的浓度范围,需要具有不同亲和力的基因编码传感器。本研究针对 ATeam 系列 ATP 生物传感器 ATP 结合域中的两个关键精氨酸残基 R103 和 R115 进行定点突变,系统考察电荷中和(R-t...
基因编码荧光蛋白(FP)生物传感器通过在活细胞中以高时空分辨率实时监测分子活动,彻底改变了细胞生物学研究。多路复用生物传感进一步拓展了这一能力,使多个信号通路可被同时追踪,从而揭示网络相互作用与动态协调。然而,荧光蛋白光谱重叠限制了其更广泛应用。为应对该挑战,研究者发展了多种创新策略:通过扩展FP谱系和新型传感器设计实现光谱分离;利...
磷脂酰肌醇结合蛋白的Pleckstrin同源(PH)结构域既能结合磷脂也能结合蛋白,常限制其作为特异性脂质生物传感器的应用。本研究在蛋白激酶B(Akt)和磷脂酰肌醇通用受体1(GRP1)的PIP3特异性PH结构域中引入定点突变,破坏蛋白介导相互作用而保留脂质结合,以提高对PIP3的传感特异性,并评估其对质膜定位和脂质追踪能力的影响。...
细胞周期依赖性激酶(CDKs)通过精确调控底物磷酸化的时间进程驱动细胞周期推进。传统生化方法和磷酸化蛋白质组学虽为 CDK 介导调控提供了重要信息,但依赖细胞群体分析,无法捕捉单个细胞中的实时动态。近年来荧光生物传感器的发展,使研究者以前所未有的时间分辨率和空间分辨率监测活细胞中 CDK 活性。本文系统综述用于测量 CDK 活性的遗...
开发稳健且生物相容的pH传感平台对监测细胞内过程与疾病诊断至关重要。本文报道一种基于硅包覆脂质体纳米颗粒(cerasome,平均粒径138.4 nm)的智能超稳定比率荧光纳米pH传感器。该传感器通过溶胶-凝胶与自组装策略将pH敏感荧光染料pyranine负载于cerasome内部,使其兼具脂质体的生物相容性与二氧化硅壳的稳定性,从而...
雌激素受体(ER)包括 ERα 和 ERβ,通过同源或异源二聚体形成调控细胞生长与分化,但精确检测其二聚化仍具挑战。本研究开发并优化了基于荧光共振能量转移(FRET)的基因编码生物传感器,用于在活细胞中实时监测 ER 动态。通过结构分析、连接肽比较和最优荧光蛋白对筛选,作者构建了三种可检测细胞核内 ERαα、ERαβ 和 ERββ ...